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申请/专利权人：广东筑美生物医疗科技有限公司
摘要：本发明公开了一种高溶解性人源化III型胶原蛋白及其表达方式与重组质粒，属于基因工程技术领域；本发明对人源III型胶原蛋白α1链的氨基酸进行亲水性分析，挑选高亲水性胶原蛋白基因片段col3a，并在重组胶原蛋白前引入来源于人源STIN2蛋白的VNTR增强子和来源于鼠源Sox9基因的TES增强子，优化合成挑选的col3a、VNTR增强子片段以及TES增强子片段，利用PCR克隆获取连接片段，通过GibsonAssembly无缝连接技术连接胶原蛋白片段col3an、VNTR增强子片段、TES增强子片段和pPIC9K载体骨架片段，构建得到所述重组质粒pPIC9K‑VNTR‑TES‑col3an。
主权项：1.一种表达高溶解性人源化III型胶原蛋白的重组质粒的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：根据毕赤酵母的密码子偏好性优化合成高亲水性胶原蛋白基因片段col3an、VNTR增强子片段以及TES增强子片段的核苷酸序列，利用PCR克隆获取连接片段并混合，通过GibsonAssembly无缝连接技术将胶原蛋白片段col3an、VNTR增强子片段、TES增强子片段以及pPIC9K载体骨架片段进行连接，构建得到所述重组质粒，命名为pPIC9K-VNTR-TES-col3an。
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权利要求：
百度查询： 广东筑美生物医疗科技有限公司 一种高溶解性人源化III型胶原蛋白及其表达方式与重组质粒
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