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申请/专利权人：中国热带农业科学院南亚热带作物研究所

摘要：本发明公开了一种砂仁根状茎石蜡切片制作方法，包括以下步骤：1取材；2固定；3脱水与透明；4对脱水材料依次采用以下步骤进行浸蜡与包埋：5对所得蜡块进行切片得到蜡带；6将切好的蜡带转移至水中，将其在水面上展开，然后放到洁净的载玻片上，做好标记或贴上标签置于切片架上，得到展开后的材料；7染色；8采用中性树胶封片，得到砂仁根状茎石蜡切片。本发明提供的方法保证了切片效果，可切出组织结构完整清晰、染色清晰分明的切片，从而便于观察砂仁根状茎的微观结构，可为砂仁根状茎的解剖学研究和功能性状之间关系和机理的揭示提供可靠的技术支持。

主权项：1.一种砂仁根状茎石蜡切片制作方法，其特征在于，包括以下步骤：1取材：选取砂仁根状茎，清洗干净后，将材料横切成小段，得到切断材料；2固定：将切断材料用FAA固定液固定，得到固定材料；所述FAA固定液的浓度为65～75％；其中，当步骤1中，砂仁根状茎为幼嫩根状茎时，步骤2中，FAA固定液固定时间为45～50h，中间更换一次FAA固定液；当步骤1中，砂仁根状茎为老的根状茎时，步骤2中，FAA固定液固定时间为20～28h，且固定后再转移至无水乙醇与丙三醇混合液中软化5-7天，所述无水乙醇与丙三醇的体积比为1:1；3脱水与透明：逐渐提高酒精溶液的体积浓度对固定材料进行脱水处理，得到脱水材料，其中，酒精溶液的体积浓度最低为50％，最高为100％；4对脱水材料依次采用以下步骤进行浸蜡与包埋：4.1置于装有石蜡与二甲苯体积比为3:1的容器中，放入58～62℃烘箱处理40min-1h；4.2转移至装有石蜡与二甲苯体积比为2：1的容器中，放入58～62℃烘箱处理40min-1h；4.3转移至装有纯二甲苯的容器中，放入58～62℃烘箱处理40min-1h；4.4转移至装有纯石蜡的容器中，放入58～62℃烘箱处理10h-14h；4.5将融化的石蜡倒入一次性包埋盒中，用镊子将步骤4.2处理后的材料移至融化的石蜡中，室温冷却凝固，得到蜡块；5对所得蜡块进行切片得到蜡带；6将切好的蜡带转移至水中，将其在水面上展开，然后放到洁净的载玻片上，做好标记或贴上标签置于切片架上，得到展开后的材料；7染色：将所得展开后的材料先置于二甲苯中处理15-30min，然后依次置于酒精与二甲苯体积比1:1的混合液、100％酒精、95％酒精、80％酒精、70％酒精、50％酒精中各浸泡2min-3min；然后置于甲苯胺蓝中浸泡30s～50s；再置于水中洗涤3min-5min；再依次置于50％酒精、70％酒精、80％酒精、95％酒精、100％酒精、100％酒精中各浸泡2min-3min；最后置于二甲苯中浸泡10-20min；8采用中性树胶封片，得到砂仁根状茎石蜡切片。

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