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摘要：本发明公开了一种毕赤酵母产PDGF‑BB的高密度发酵方法，所述方法对毕赤酵母产PDGF‑BB的发酵培养基进行了优化，并在甘油补加阶段使用了指数补料的方式，契合菌体生长的比生长速率，使菌体状态继续维持在高活性，同时使培养基中的甘油没有残留，发酵时间明显缩短，不仅显著增加了蛋白质产量，也使其生物活性获得显著提高。
主权项：1.一种毕赤酵母产PDGF-BB的高密度发酵方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：（1）菌体初始培养：将毕赤酵母种子液接入含有氯化钠的发酵培养基中，接种比例10～15vv%，接种OD600=10～20，初始培养条件为30～32℃，pH4.5～5.5，通气量0.5～1.5vvm，随着菌体的不断生长，通过增大转速和通气量，控制溶氧在40%以上，本步骤时间为18～22小时，当溶氧值快速回升至80%以上进入步骤（2）；（2）补加甘油：步骤（1）结束后，补加50vv%左右的甘油溶液，补加速率为以9～11mlLh起始，并以指数补料的方式补加，培养过程中调整转速和通气量控制溶氧在30～60%，本步骤时间为3-5小时，当菌体OD600达到190-210时，菌体湿重在145～155gl时，停止补加甘油；（3）诱导：步骤（2）结束后，无需饥饿，降低培养温度至24～28℃，开始补加100%甲醇溶液进行诱导培养，诱导过程中调整转速和通气量控制溶氧在35～55%，诱导48h后结束发酵。
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百度查询： 华芢生物科技(青岛)股份有限公司 一种毕赤酵母产PDGF-BB的高密度发酵方法
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