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申请/专利权人：湖北共同甾体药物研究院有限公司
摘要：本发明涉及微生物制药及医药化工技术领域，提出了一种重组菌的构建及其制备醋酸泼尼松的方法，所述重组菌的构建方法，包括以下步骤：S1，扩增SUMO蛋白基因和KsdD5蛋白酶基因，然后将pET28a质粒酶切后与SUMO基因和KsdD5基因无缝连接，获得重组质粒pET28a‑SUMO‑KsdD5；S2，将重组质粒pET28a‑SUMO‑KsdD5转化至大肠杆菌BL21感受态细胞，培养后得到重组菌。本发明将SUMO基因与KsdD5连接于pET28a+质粒上，得到重组脱氢酶质粒，随后进行融合表达，可利用细胞本身的FAD辅酶再生体系，无需添加外源性的辅酶FAD；此外SUMO蛋白提高了脱氢酶KsdD5在大肠杆菌BL21DE3中的溶解性，以及蛋白表达量，同时也提高了脱氢酶KsdD5转化醋酸泼尼松的效率。
主权项：1.一种重组菌的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：S1，扩增SUMO蛋白基因和KsdD5蛋白酶基因，然后将pET28a质粒酶切后与SUMO基因和KsdD5基因无缝连接，获得重组质粒pET28a-SUMO-KsdD5；S2，将重组质粒pET28a-SUMO-KsdD5转化至大肠杆菌BL21感受态细胞，培养后得到重组菌。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 湖北共同甾体药物研究院有限公司 一种重组菌的构建及其制备醋酸泼尼松的方法
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