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一种生产乳糖-N-四糖的大肠杆菌及基于其的双菌耦合发酵方法 

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申请/专利权人:江南大学

摘要:本发明公开了一种生产乳糖‑N‑四糖的大肠杆菌及基于其的双菌耦合发酵方法。本发明首先在大肠杆菌中构建了LNT生物合成途径;然后对双质粒系统进行组合优化,构建了四株工程菌,并筛选出EP3菌株含有galT1‑SPase和galE‑Cvβ3GalT表达框与酵母耦合发酵产LNT能力最优,可产生25.2gLLNT,其摩尔转化率molmolLNTII为71.22%。接着对生产体系进行优化,比较UTP和UMP作为辅因子对LNT合成的影响,在仅添加20mMUMP作为辅因子时,即可生成29.4gLLNT,其摩尔转化率molmolLNTII为83.09%。最后补料分批培养EP3菌株,经全细胞催化后产生39.6gLNT。本发明为高效廉价生产LNT提供了一种新的策略。

主权项:1.一种生产乳糖-N-四糖的重组大肠杆菌,其特征在于,所述重组大肠杆菌中含有第一基因表达框和第二基因表达框,所述第一基因表达框中含有蔗糖磷酸化酶编码基因SPase和UDP-葡萄糖-己糖-1-磷酸尿苷酰转移酶编码基因galT,所述第二基因表达框中含有UDP-葡萄糖-4-差向异构酶编码基因galE和β-1,3-半乳糖基转移酶编码基因Cvβ3GalT。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 江南大学 一种生产乳糖-N-四糖的大肠杆菌及基于其的双菌耦合发酵方法

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