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申请/专利权人：江西省林业科学院
摘要：本发明提供了闽楠原生质体的制备方法及其在单细胞测序中的应用；本发明通过筛选得到了闽楠原生质体最佳制备方法，包括酶解液的组成、酶解时间及纯化时离心的条件等；同时本发明提供的方法制备的闽楠原生质体复合单细胞测序的条件，能够进行单细胞测序；本发明通过单细胞测序构建了闽楠原生质体的细胞图谱，可为樟科及其他木本植物分化发育研究提供全新的见解、思路；本发明提供的闽楠原生质体制备方法，改善了目前珍稀树木尚未公开原生质体制备方法的问题。
主权项：1.一种可用于单细胞测序的闽楠原生质体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：加入1-1.5mL甘露醇溶液，0.1-0.15mL巯基乙醇和0.15-0.2g聚乙烯吡咯烷酮至所述闽楠1-2月幼茎中，研磨后制得闽楠幼茎研磨液；使用酶解液酶解闽楠幼茎研磨液，制得闽楠原生质体粗液；所述酶解液由0.5-0.7molL甘露醇、1-2%纤维素R-10、1-2%离析酶R-10组成；所述酶解时间为3-12h；将原生质体粗液过筛，并加入WB液，重悬并进行第一次离心；第一次离心完成后，弃上清，加入WB液，再重悬并进行第二次离心；第二次离心完成后，弃上清，加入WB液；重复所述第一次离心的步骤和第二次离心的步骤；最后一次离心完成后，弃上清液，加入WB液混匀，制得闽楠原生质体悬液；所述WB液由0.5-0.7molL甘露醇、0.03%-0.04%牛血清白蛋白、0.85-0.88mgmL维生素C、0.02-0.03gmL尿素组成。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江西省林业科学院 闽楠原生质体的制备方法及其在单细胞测序中的应用
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