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申请/专利权人：深圳市大道测序生物科技有限公司
摘要：本申请属于基因测序技术领域，具体涉及一种恒温测序方法。本申请所提供的方法包括：在固相载体表面固定多个扩增寡核苷酸；所述扩增寡核苷酸包括第一扩增寡核苷酸和第二扩增寡核苷酸；提供单链模板多核苷酸进行文库杂交，将所述单链模板多核苷酸与所述第一扩增寡核苷酸和第二扩增寡核苷酸杂交；加入第一扩增试剂，进行首次扩增，生成固定在固相载体表面的模板互补链；加入第二扩增试剂，进行文库扩增，在扩增位点处制备靶核酸拷贝链；线性化处理所述靶核酸拷贝链进行测序引物杂交，采用动态五元络合物测序、测序链延伸，信号采集，获取测序结果。本申请提供的测序方法快速高效、不需要复杂频繁升降温，能够实现低温恒温测序。
主权项：1.一种恒温测序方法，其特征在于，包括：S1、在固相载体表面固定扩增寡核苷酸；所述扩增寡核苷酸包括第一扩增寡核苷酸和第二扩增寡核苷酸；S2、提供单链模板多核苷酸进行文库杂交，将所述单链模板多核苷酸与所述第一扩增寡核苷酸和第二扩增寡核苷酸杂交，制备待扩增产物；S3、加入第一扩增试剂，与待扩增产物进行首次扩增，生成固定在固相载体表面的模板互补链；S4、加入第二扩增试剂，进行文库扩增，在扩增位点处制备靶核酸拷贝链；S5、线性化处理所述靶核酸拷贝链进行测序引物杂交，信号采集，获取测序结果；其中，所述扩增为恒温扩增，所述恒温扩增的温度小于60℃。
全文数据：
权利要求：
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