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申请/专利权人：合曜生物科技(南京)有限公司
摘要：本发明公开了一种高产2'‑岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌及其构建方法与应用。所述方法包括对大肠杆菌进行如下方式的改造：过表达GDP‑L‑岩藻糖的从头合成途径基因，引入不同来源的岩藻糖基转移酶基因，增加futC的拷贝数，引入乳糖转运蛋白Lac12，敲除竞争途径的lacZ、wcaJ、poxB、lon基因，过表达磷酸戊糖通路PPP上的zwf、prs基因，过表达GTP再生途径基因及其上游嘌呤操纵子基因，敲除purR基因且弱化purA基因。本发明构建的产2'‑岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌在摇瓶中发酵72小时后的2′‑FL产量可达11.1gL，在5L发酵罐中发酵72h后的2′‑FL产量可达46gL。
主权项：1.一种产2′-岩藻糖基乳糖重组菌的构建方法，包括将manA基因、manB基因、manC基因、gmd基因、flc基因和futC基因导入大肠杆菌中的步骤；所述方法还包括如下步骤：将所述大肠杆菌中的fliR基因替换为WbsJ基因，且将所述大肠杆菌中的motA基因替换为WbgL基因，且将所述大肠杆菌中的flhD基因替换为Wcfb基因；所述manA基因的序列如序列表中序列1所示；所述manB基因的序列如序列表中序列2所示；所述manC基因的序列如序列表中序列3所示；所述gmd基因的序列如序列表中序列4所示；所述flc基因的序列如序列表中序列5所示；所述futC基因的序列如序列表中序列6所示；所述fliR基因的序列如序列表中序列7所示；所述WbsJ基因的序列如序列表中序列8所示；所述motA基因的序列如序列表中序列9所示；所述WbgL基因的序列如序列表中序列10所示；所述flhD基因的序列如序列表中序列11所示；所述Wcfb基因的序列如序列表中序列12所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 合曜生物科技(南京)有限公司 一种高产2 '-岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌及其构建方法与应用
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