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一种用于分析circRNA-microRNA相互作用的二合一集成测定法 

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申请/专利权人:南京大学

摘要:本发明公开了一种用于分析circRNA‑microRNA相互作用的二合一集成测定法,包括如下步骤:1制备功能化MB:捕获探针通过生物素和链霉亲和素之间的特异性结合固定在SA‑MB的表面上;2circRNA‑miRNA相互作用分析。本发明的测定方法灵敏度高,可用于分析circRNA‑miRNA相互作用cmRRI的方法,有望在生物医学和临床发明中为分析RNA对话系统中的cmRRIs提供一个有用的工具。

主权项:1.一种用于分析circRNA-microRNA相互作用的二合一集成测定法,其特征在于包括如下步骤:(1)制备功能化磁珠(MB):捕获探针通过生物素和链霉亲和素之间的特异性结合固定在SA-MB的表面上;step1将100μL的10mgmL链霉亲和素修饰的磁珠(SA-MB)用1mL的洗涤缓冲液洗涤两次,然后重悬于500μL的生物素-链霉亲和素结合缓冲液中;(2)circRNA-miRNA相互作用分析:功能化MB将circRNAmiRNA复合物分离出来后,以miRNA为引物进行的滚环扩增(RCA)产物将自淬灭探针打开产生荧光信号;step1在100μL杂交缓冲液中分别混合不同浓度的circRNA,所述的circRNA的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示,1μM的miRNA,所述的miRNA的核苷酸序列如SEQIDNO:5所示,和2μL的10mgmL制备的带有捕获探针的磁珠,所述的捕获探针的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示,并在37℃下孵育30分钟。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 南京大学 一种用于分析circRNA-microRNA相互作用的二合一集成测定法

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