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申请/专利权人:上海应用技术大学;上海交通大学
摘要:本发明公开了一种味觉受体蛋白与呈味配体相互作用的分析方法,包括如下步骤:对味觉受体蛋白与呈味配体进行实验前处理;利用微量热泳动技术仪对味觉受体蛋白与呈味配体的分子互作实验进行预测试;测试通过,进而进行二者之间亲和力检测;最后对亲和力结果进行分析,以此研究味觉受体蛋白与呈味配体之间分子相互作用的效果。本发明是一种全新的研究味觉受体蛋白与呈味配体之间分子互作的方法,弥补了味觉受体蛋白与呈味配体间相互作用研究的不足,该方法简单快速,结果直观可靠,适用性广泛。
主权项:1.一种味觉受体蛋白与呈味配体相互作用的分析方法,其特征在于,包括如下步骤:1配制检测溶液:①味觉受体蛋白受试液的制备:将经荧光染料标记过的味觉受体蛋白用缓冲溶液溶解;②呈味配体受试储备液的制备:取呈味配体标准品用所述缓冲溶液溶解定容,作为初始浓度的呈味配体受试储备液;③微量热泳动仪测试样品的制备:使用所述味觉受体蛋白受试液以及所述呈味配体受试储备液配制梯度浓度的呈味配体与恒定浓度的味觉受体蛋白测试样品;2微量热泳动仪参数设置:使用微量热泳动仪对①中的所述味觉受体蛋白受试液进行预测试,根据预测试结果设定测量参数;3味觉受体蛋白与呈味配体亲和力的测定:根据2的测试参数,按照所述呈味配体的实际浓度设置配体初始浓度,设定测试温度,吸取步骤2③中测试样品,将所述测试样品放置于微量热泳动仪内测试呈味配体与味觉受体蛋白的相互作用;4亲和力数据处理与分析:通过微量热泳动仪的内置数据处理软件MO.Control和MO.AffinityAnalysis计算得到解离常数Kd值进行数据结果处理分析,得到味觉受体蛋白与呈味配体的结合能力及热动力学参数。
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百度查询: 上海应用技术大学 上海交通大学 一种味觉受体蛋白与呈味配体相互作用的分析方法
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