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摘要:本发明涉及生物技术领域,具体涉及到一种提高HumanIL‑1β靶标检测灵敏度的方法及其应用。本发明提供一种提高HumanIL‑1β靶标检测灵敏度的ELISA双抗体夹心法,相较于传统一步ELISA夹心法捕获抗体束缚在酶标板上的情况,本发明提供的方法将抗原与双抗体在整个液相中进行孵育反应,有利于抗体结合位点的充分暴露,有利于增加抗原与抗体的碰撞几率,相较于直接将抗体固定在酶标板上的情况,使用Cy3作为捕获标签,提高了靶标抗体结合效率及靶标的检测灵敏度。且本发明对检测HumanIL‑1β的试剂进行了冻干处理,通过对冻干液的优化,增加了试剂的稳定性,使该试剂能进行常温运输,节约运输成本。
主权项:1.一种检测IL-1β的方法,其特征在于,包括:A.将抗Cy3抗体包被至酶标板上,获得包被Cy3抗体的酶标板;B.用Cy3标记IL-1β抗体,获得抗体1;C.用生物酶标记IL-1β抗体,获得抗体2;D.将抗体1与抗体2混合,获得混合抗体3;E.将待测样品与所述混合抗体3进行第一次共孵育,获得免疫复合物1;F.将所述免疫复合物1加入步骤A中包被Cy3抗体的酶标板进行第二次孵育,获得免疫复合物2;G.向所述免疫复合物2中加入发光底物液,检测发光强度,以便获取所述待测样品中的IL-1β含量。
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百度查询: 伊莱瑞特(武汉)生物技术有限公司 一种提高Human IL-1β靶标检测灵敏度的方法及其应用
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