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摘要：本发明公开了一种CHO‑K1的悬浮驯化方法，方法包括以下步骤：（1）将复苏后的CHO‑K1细胞用含5%血清培养液在培养皿中贴壁培养，在贴壁周期内震荡培养皿；细胞贴壁丰度至65~75%且含悬浮细胞时，收集培养皿内的细胞上清液；将培养皿内消化的下来的细胞与细胞上清液轻柔吹打混匀，按照静置换液法传代；（2）用含5%血清培养液摇瓶培养；（3）用含2%血清培养液摇瓶培养；（4）用无血清培养液摇瓶培养；（5）用无血清培养液进行连续摇瓶传代培养得到稳定细胞系。本发明的目的在于减少悬浮驯化所用工艺步骤，缩短悬浮驯化所用时间，减少悬浮驯化所用细胞的代次，节省细胞悬浮驯化所用成本。
主权项：1.一种CHO-K1的悬浮驯化方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：（1）将CHO-K1细胞用含5%血清培养液进行贴壁培养，在贴壁周期内震荡培养皿；细胞贴壁丰度至65~75%且含悬浮细胞时，收集培养皿内的细胞上清液，且将培养皿内剩下贴壁的细胞用消化液消化；将培养皿内消化的下来的细胞与细胞上清液轻柔吹打混匀，按照静置换液法传代；（2）将步骤（1）得到的CHO-K1细胞用含5%血清培养液进行摇瓶培养；（3）将步骤（2）得到的CHO-K1细胞用含2%血清培养液进行摇瓶培养；（4）将步骤（3）得到的CHO-K1细胞用无血清培养液进行摇瓶培养；（5）将步骤（4）得到的CHO-K1细胞进行连续摇瓶传代培养得到稳定细胞系。
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百度查询： 深圳市卫光生物制品股份有限公司 一种CHO-K1的悬浮驯化方法
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