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摘要：本申请涉及生物技术领域，具体公开了一种岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系及其制备方法和应用。该制备方法包括：针对FUT8基因的序列，设计引导核酸酶切割的sgRNA序列，将该序列连入酶切后的CRISPRCas9质粒上，再将得到的连接载体转入细菌感受态细胞，得到构建成功的sgRNA质粒；最后将sgRNA质粒转染至CHO细胞中，筛选出单克隆细胞进行扩大培养，得到稳定的岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系。该方法能够显著提高了sgRNA的打靶效率，因而显著提高了FUT8基因的敲除效率，更容易获得敲除阳性的CHO细胞，进而更容易获得岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系。
主权项：1.一种岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系的制备方法，其特征在于，其包括：针对FUT8基因的序列，设计引导核酸酶切割的sgRNA序列，所述sgRNA序列如SEQIDNO.1所示；将所述sgRNA序列连入酶切后的CRISPRCas9质粒上，得到连接载体，将所述连接载体转入细菌感受态细胞，经测序鉴定后，得到构建成功的sgRNA质粒；再将所述sgRNA质粒转染至CHO细胞中，筛选出单克隆细胞进行扩大培养，得到稳定的岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系。
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百度查询： 吉满生物科技(上海)有限公司 岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系及其制备方法和应用
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