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摘要:本发明公开了基于超分支滚环扩增检测落叶松枯梢病菌的探针引物组、试剂盒及检测方法,探针引物组包括:锁式探针NL‑FD、第一滚环扩增引物NL‑F1、第二滚环扩增引物NL‑F2、以及检测探针cZip。本发明根据落叶松枯梢病菌ITS基因的保守序列作为靶标基因设计了锁式探针,建立了完整的滚环扩增体系,并将其与核酸试纸条相结合,实现可视化检测。本发明运用了超分支滚环扩增技术结合侧向流试纸条来检测落叶松枯梢病菌能够使HRCA扩增检测结果更直观快速,同时具有较高的特异性和灵敏度,最低检测限度浓度为1pgμL,显示出其在现场检测的潜力,满足落叶松枯梢病菌在基层的准确鉴定应用。
主权项:1.一种基于超分支滚环扩增检测落叶松枯梢病菌的探针引物组,其特征在于,包括:锁式探针NL-FD、检测探针cZip、以及第一滚环扩增引物NL-F1、第二滚环扩增引物NL-F2,其中,所述锁式探针NL-FD的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,引物检测探针cZip的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示,所述第一滚环扩增引物NL-F1的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示,所述第二滚环扩增引物NL-F2的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示。
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百度查询: 北京林业大学 基于超分支滚环扩增检测落叶松枯梢病菌的探针引物组、试剂盒及检测方法
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