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一种磁珠法微生物基因组提取试剂盒及微生物基因组提取方法 

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摘要:本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种磁珠法微生物基因组提取试剂盒及微生物基因组提取方法。本发明的试剂盒包括设置微生物破壁单元和微生物裂解单元;所述微生物破壁单元包括破壁试剂和破壁酶组合物试剂;所述微生物裂解单元包括蛋白酶试剂和裂解试剂。本发明还提供了一种基于所述磁珠法微生物基因组提取试剂盒来提取微生物基因组的方法。本发明的试剂盒能够对同时包含真菌(白色念珠菌)、革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌、屎肠球菌)、革兰氏阴性菌(大肠埃希菌)的样本进行一次性基因组提取。

主权项:1.一种磁珠法微生物基因组提取试剂盒,其特征在于,包括设置微生物破壁单元和微生物裂解单元;所述微生物破壁单元包括破壁试剂和破壁酶组合物试剂;所述微生物裂解单元包括蛋白酶试剂和裂解试剂;其中,所述破壁试剂包括5-10mM二硫苏糖醇、10-20mM三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、1-5mM乙二胺四乙酸和0.1%-0.5%聚乙二醇辛基苯基醚;所述破壁试剂的pH值为7.5-8.5的弱碱性;所述磁珠法微生物基因组提取试剂盒中设置的每组破壁试剂的单位用量为不少于80µL;所述破壁酶组合物试剂包括溶壁酶、溶菌酶和溶葡球菌酶;所述磁珠法微生物基因组提取试剂盒中设置的每组破壁酶试剂的单位用量为不低于5µL;所述蛋白酶试剂设置为单一蛋白酶和或复合蛋白酶;所述蛋白酶试剂中设置的蛋白酶具有适应于pH范围4-12.5和温度范围50-70℃的生物活性;所述裂解试剂包括200-400mM三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、20-50mM乙二胺四乙酸、1%-5%聚乙二醇辛基苯基醚、500-1000mM氯化钠、0.1-0.5mM对羟基苯甲酸甲酯钠和1%-5%吐温;所述裂解试剂的pH值为7.5-8.5的弱碱性;所述磁珠法微生物基因组提取试剂盒中设置的每组蛋白酶试剂的单位用量为不低于5µL,每组裂解试剂的单位用量为不少于30µL;所述磁珠法微生物基因组提取试剂盒中还设置有表面修饰有羧基和或羟基的磁珠;以及高盐的磁珠结合试剂和低盐的磁珠洗脱试剂。

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