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摘要：本发明涉及利用增强的先导编辑阻断异常血管生成的药剂及制备方法，药剂携带有靶向基因组VEGFR2的LTR‑U6‑epegRNA‑EF1α‑nSpCas9‑RT‑LTR和LTR‑U6‑nickingsgRNA‑EF1α‑MLH1dn‑LTR；本申请的药剂，通过LTR‑U6‑epegRNA‑EF1α‑nSpCas9‑RT‑LTR和LTR‑U6‑nickingsgRNA‑EF1α‑MLH1dn‑LTR对VEGFR2基因位点编辑，使得视网膜VEGFR2T17967A更早的突变产生终止密码子TAG,K796stop和DN‑VEGFR2，从而阻断了视网膜VEGFR2的表达和活性，阻断OIR小鼠模型的视网膜异常血管生成，达到预防病理性视网膜血管生成目的。
主权项：1.一种利用增强的先导编辑阻断异常血管生成的药剂，其特征在于，所述药剂携带有靶向基因组VEGFR2的LTR-U6-epegRNA-EF1α-nSpCas9-RT-LTR和LTR-U6-nickingsgRNA-EF1α-MLH1dn-LTR；所述epegRNA的序列为： 所述ngRNAnickingsgRNA制作采用方法：退火顶部寡核苷酸5'CACCG-TCATCCAAGGGCAATTCATC和底部寡核苷酸5'-aaac-20nt-c-3'，20nt为互补的顶部寡核苷酸序列；所述nSpCas9采用nSpCas9H840A；所述LTR-U6-epegRNA-EF1α-nSpCas9-RT-LTR用于表达由U6启动子驱动的结构化RNA序列的epegRNA和由EF1α核心启动子驱动的密码子优化逆转录酶的nSpCas9H840A融合蛋白。
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百度查询： 深圳市眼科医院(深圳市眼病防治研究所) 利用增强的先导编辑阻断异常血管生成的药剂及制备方法
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