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摘要：本发明公开了一种人源生物角膜基质的制备方法，它由人源角膜溶液和PEGDA骨架组成。该人源生物角膜基质由人源角膜组织重构制备，具有良好的生物相容性和促再生能力，同时具备人角膜组织的光学特性和超微结构特征。
主权项：1.一种人源生物角膜基质的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：a）制备人角膜基质溶液、b）制备聚乙二醇双丙烯酸酯（PEGDA）角膜基质骨架、c）将人角膜基质溶液浸入并固定到PEGDA角膜基质骨架中；其中，步骤a）包括如下步骤：（a1）将人角膜基质浸泡在含有300-800UmL脱氧核糖核酸酶的0.1-0.5%脱氧胆酸钠溶液中1-5小时，随后用PBS缓冲液清洗，得到脱细胞人角膜基质；（a2）将脱细胞人角膜基质冷冻干燥后称重，以1-10%的质量体积比，浸泡到胃蛋白酶溶液或胶原酶溶液中24-72小时；（a3）加入碱性溶液中和，搅拌直至溶液的pH值为6.8-8.0，溶液恢复透明，得到人角膜基质溶液；或将（a2）制备的人角膜基质溶液，置于冻干机中冻干，然后用磷酸盐缓冲液溶解，得到浓度为1%-10%的脱细胞人角膜基质溶液；所述冻干的条件为：温度-50℃、真空度为500mTorr的条件下冻干12-36小时；步骤b）包括：通过角膜模具制备，包括将PEGDA灌入角膜模具中，通过365nm紫外光源照射后得到PEGDA角膜基质骨架；或包括将PEGDA浸入到角膜基质中，并通过光激活或温度激活将其固化在角膜基质内部；随后通过10-25%的盐酸浸泡，去除角膜中的生物组分，保留PEGDA角膜基质骨架；所述角膜基质经刮除角膜上皮和内皮，PBS缓冲液冲洗后得到；步骤c）包括如下步骤：（c1）将步骤b）得到的PEGDA角膜基质骨架浸泡到步骤a）得到的人角膜基质溶液中，抽真空6-24小时；（c2）取出PEGDA角膜基质骨架，去除表面溶液，静置20-60分钟；（c3）将PEGDA角膜基质骨架浸泡于交联剂中至少10分钟，得到人源生物角膜基质。
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百度查询： 山东第一医科大学附属眼科研究所(山东省眼科研究所、山东第一医科大学附属青岛眼科医院) 一种人源生物角膜基质的制备方法和应用
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