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循环肿瘤细胞的比率式检测试剂盒及其制备方法和应用 

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摘要:本发明公开了一种循环肿瘤细胞(CTCs)的比率式检测试剂盒及其制备方法和应用,该比率式检测试剂盒包括第一试剂Walker探针、第二试剂SERS探针、第三试剂硫酸锌溶液。所述试剂盒用于CTCs检测时,向含有待检测CTCs的样品中加入第一试剂、第二试剂和第三试剂,磁性分离后检测SERS光谱获取第二试剂SERS探针上拉曼分子DTNB和第一试剂中ROX分子的SERS特征峰强度的比值IRIR=I1331I1500,实现对CTCs的比率式SERS定量检测。本发明公开的比率式检测试剂盒制备方法简单,检测灵敏度与特异性高,结果稳定性好,可满足血液中稀有CTCs可靠检测计数要求,具有突出的应用优势。

主权项:1.一种循环肿瘤细胞的比率式检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒包括第一试剂、第二试剂和第三试剂;所述第一试剂为Walker探针,所述Walker探针是通过磁核金壳纳米颗粒表面修饰walking核酸链、含有酶切响应底物的发夹型核酸链H1、巯基聚乙二醇甲氧基SH-PEG-OMe制备得到;所述walking核酸链是由核酸适配体链SYL3C-ROX与Zn2+特异性DNAzyme链杂交而成的;所述核酸适配体链SYL3C-ROX、Zn2+特异性DNAzyme链、发夹型核酸链H1的碱基序列分别如SEQIDNO.1、SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示;所述第二试剂为SERS探针,所述SERS探针是通过金纳米颗粒表面修饰发夹型核酸链H2和拉曼信号分子5,5’-二硫代双2-硝基苯甲酸制备得到;所述发夹型核酸链H2的碱基序列如SEQIDNO.4所示;所述第三试剂为辅助DNAzyme特异性切割底物核酸链的硫酸锌溶液。

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