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摘要:本发明属于药食两用发酵后产物技术领域,提供一种护胃、保肝、解酒的酸枣猴头菌‑壳聚糖纳米颗粒及其制备方法和应用;酸枣等果肉原浆制备成酸枣复方原浆培养基;猴头菌液体种子培养液在酸枣复方培养基中共发酵,得猴头菌共发酵产物;植物乳杆菌接种于猴头菌共发酵产物,再接种至乳酸菌培养基中,得益生菌菌泥;益生菌菌泥和洗脱液混合得菌悬液,菌悬液加冻干保护剂冷冻干燥得复方冻干粉;葛根超微粉制备成葛根碳纳米点;葛根碳纳米点加入复方冻干粉得冻干粉混合物;三聚磷酸钠溶液和壳聚糖溶液加入冻干粉溶液中得猴头菌‑壳聚糖纳米颗粒。具有护胃、保肝解酒的功效。可制备成用于护胃、保肝解酒的药品或保健品。
主权项:1.一种护胃、保肝、解酒的酸枣猴头菌-壳聚糖纳米颗粒的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)原料处理:葛根超微粉的制备:葛根常温高速粉碎机粉碎1min,振动磨超微粉碎机粉碎8min,过250-300目筛,制得葛根超微粉,收集密封备用;猴头菌的液体种子培养液的制备:猴头菌菌种接种至固体斜面培养基上,28℃恒温培养7d,然后接种于制备好的猴头菌液体种子培养基中,摇瓶培养7d,即为猴头菌的液体种子培养液;果肉的获得:酸枣、拐枣、枸杞子、五味子、沙棘果的质量份为酸枣18-24份,拐枣12-18份、枸杞子8-15份、五味子3-5份,沙棘1-6份;挑拣个大饱满,质地均匀的酸枣、拐枣、枸杞子、五味子,分别50-70℃中干燥10-20h,分批次倒入果肉分离机进行果肉分离;将所得酸枣果肉、拐枣果肉、枸杞子果肉、五味子果肉按比例粉碎,加入果肉重量的8-10倍的蒸馏水,浸泡2h;沙棘汁的制备:挑选饱满及无明显损伤的沙棘果用蒸馏水清洗,50-70℃中干燥10-20h,加入等重量的蒸馏水于密闭容器中,注入2%-5%wv的碳酸钠溶液进行脱涩,然后将脱涩的沙棘果与等质量蒸馏水混合榨汁破碎,过滤去除沙棘籽颗粒,得到沙棘汁备用;(2)果肉原浆A的制备:将步骤(1)所得果肉与沙棘汁混合均匀,于罐组式动态逆流提取仪中连续逆流提取,连续逆流提取的料液比为1:4-1:10,提取温度40℃-100℃,蒸馏水沿物料浓度由低向高输送经过各罐并多次套用,提取1-3次,每次提取2h,得到浓度为5-10gmL的果肉提取液;按照料液比为4:6的比例在果肉提取液中加入蒸馏水进行均质,控制均质条件为均质压力120MPa,处理3-5次得到果肉原浆A;(3)酸枣复方原浆培养基的制备:步骤(2)所得果肉原浆A用80目绢布过滤果肉和纤维,按照料液比为1:5-1:25加入去离子水,加苹果酸-苹果酸钠调节pH至3-6,磁感应电场提取果肉多糖25min;磁感应电场条件为:反应频率200-700Hz,电压600-1000V,提取温度50-80℃;将提取的果肉多糖速冻浓缩至0.5-1gml;速冻浓缩的条件为:冷冻温度为-80℃,真空度为0-10Pa,冷阱温度为-30~-45℃,时间为25-30h;将浓缩液质量0.2%-0.4%的木瓜蛋白酶加入浓缩液中,混匀后45℃恒温水浴搅拌酶解2.5h,然后沸水加热灭酶5min,立即用冷水冷却至室温,过滤,得到浆料,浆料分成若干份进行超滤处理,合并滤液,滤液于121℃下灭菌20min即得到酸枣复方原浆培养基;(4)猴头菌共发酵产物的制备:将步骤(1)中所制备的猴头菌的液体种子培养液加入步骤(3)制备的酸枣复方原浆培养基中,室温避光,摇床培养,所得发酵产物真空冷冻干燥后冷冻粉碎,过筛,得到猴头菌共发酵产物;(5)将植物乳杆菌接种于猴头菌共发酵产物中,37℃培养,活化2-3次,即得益生菌种子液;将益生菌种子液按照1%-5%的接种量接种入制备好的乳酸菌培养基中,37℃恒温厌氧培养16-20h,离心,灭菌,获得益生菌菌泥;将益生菌菌泥与洗脱液以1:1-1:5的比例混合,搅拌直至获得均匀的菌悬液;(6)将步骤(5)中的菌悬液混合均匀,加入冻干保护剂,搅拌均匀,得到混合菌悬液,真空冷冻干燥,即得到复方冻干粉;(7)步骤(1)所得葛根超微粉加入蒸馏水磁力搅拌10min,使其充分溶解,然后高温高压反应釜中加热至200℃,恒温30min,冷却至室温,加入10-15ml的蒸馏水,0.22μm聚醚砜滤膜过滤;过滤后的溶液超滤管离心纯化,冻干,即得葛根碳纳米点;按照质量比为1:5将葛根碳纳米点与步骤(6)所得复方冻干粉混合,即得冻干粉混合物;(8)冻干粉混合物加水复溶为冻干粉溶液;壳聚糖溶于冰醋酸中,搅拌过夜,得壳聚糖溶液;将三聚磷酸钠溶液和壳聚糖溶液逐滴滴入复溶后的冻干粉溶液中反应1-2h,磁力搅拌机搅拌15-30min,超声15-20min,得到猴头菌-壳聚糖纳米溶液;(9)所得猴头菌-壳聚糖纳米溶液8000rmin-12000rmin离心20-40min,取沉淀,离子水洗涤3次,超声5min,得到均匀的悬浮液;悬浮液在-70~-90℃预冻8-12h,真空度为0.1-10Pa、-40~-60℃真空冷冻干燥30-50h,得到护胃、保肝、解酒的酸枣猴头菌-壳聚糖纳米颗粒。
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