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申请/专利权人:吉纳斯公司
摘要:描述了用于移植到受体雌性的冷冻保存有蹄动物胚胎的技术。
主权项:1.一种制备体外生产的有蹄类动物胚胎的方法,所述方法包括步骤:在第一孵育条件下体外孵育未成熟的卵母细胞以获得成熟的卵母细胞;使所述成熟的卵母细胞受精从而产生受精卵;剥露所述受精卵;在第二孵育条件下孵育所述受精卵以制备所述体外生产的有蹄类动物胚胎,所述第二孵育条件包括含5%氧O2和5%二氧化碳CO2的环境;冷冻所述体外生产的有蹄类动物胚胎,其中所述冷冻包括以下步骤:1在10℃和38℃之间的第一温度下,在包含1.0-4M乙二醇的冷冻溶液中孵育所述胚胎5-30分钟;2将所述胚胎装载到容器中,其包括添加:i第一解冻溶液至所述容器;ii第一气泡和第二解冻溶液,其中所述第一气泡分隔所述第一和第二解冻溶液;iii第二气泡和冷冻溶液中的所述体外生产的有蹄类动物胚胎,其中所述第二气泡分隔所述第二解冻溶液和冷冻溶液中的所述体外生产的有蹄类动物胚胎;iv第三气泡;v第三解冻溶液,其中所述第三气泡分隔冷冻溶液中的所述体外生产的有蹄类动物胚胎和所述第三解冻溶液;vi第四气泡;和vii第四解冻溶液,其中所述第四气泡分隔所述第三和第四解冻溶液,并且,所述第一、第二、第三和第四解冻溶液包含在等渗稀释溶液中的乙二醇;3将所述胚胎暴露于-2至-10℃的温度,持续1分钟至60分钟的时间段;4以每分钟-0.2至-0.8℃的速度降低所述温度,直到达到-30至-36℃的第二温度;和5将所述胚胎浸入液氮中储存。
全文数据:
权利要求:
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