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申请/专利权人:中国科学院微生物研究所
摘要:本发明属于生物催化技术领域,本发明公开了一种工程菌及其高效催化CDCA生产UDCA的方法。本发明以大肠杆菌BW25113作为出发菌株,通过敲除基因,得到两株能够显著提高内源辅酶NADPH转换效率的底盘菌株ΔmazGBW25113和ΔpgiBW25113。在此基础上,将7α‑HSDH‑LDH和7β‑HSDH‑GDH在底盘菌株中异源表达,并构建辅酶循环再生体系,串联高效催化生产熊去氧胆酸UDCA。底物是鹅去氧胆酸CDCA,投料高达150gL,转化率≥99.0%,产物纯度≥98.5%,且无任何副产物生成。本发明技术方案通过高效生物催化CDCA生产UDCA的方法,具有生产成本低、反应温和、转化率高、生产效率高等特点,是熊去氧胆酸工业化生产的优选之路。
主权项:1.工程菌7α-HSDH-LDH-ΔmazGBW25113,其特征在于,所述工程菌7α-HSDH-LDH-ΔmazGBW25113由含有7α-HSDH基因片段和LDH基因片段的质粒载体转入敲除mazG基因片段的底盘菌株中获得;所述含有7α-HSDH基因片段和LDH基因片段的质粒载体是由7α-HSDH基因和LDH基因导入pBAD质粒载体获得;所述敲除mazG基因片段的底盘菌株是由大肠杆菌BW25113菌株敲除mazG基因获得;所述7α-HSDH基因具有SEQIDNO.6所示的氨基酸序列;所述LDH基因具有SEQIDNO.8所示的氨基酸序列;所述mazG基因具有SEQIDNO.2所示的氨基酸序列。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中国科学院微生物研究所 工程菌及其高效催化CDCA生产UDCA的方法
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