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一种基于AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器的检测方法和应用 

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申请/专利权人:湖北工业大学

摘要:本发明公开一种AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器及其制备方法和应用,用于神经毒性农药残留的快速灵敏检测。氯化乙酰胆碱ACh可被乙酰胆碱酯酶AChE催化生成胆碱,再被胆碱氧化酶CHO水解成甜菜碱和过氧化氢H2O2;啶虫脒会使AChE失活,从而导致产生的H2O2减少;其中ACh、AChE和CHO为反应底物,引入顺磁离子Fe2+;H2O2会引起Fe2+Fe3+的转化,从而影响周围水分子中氢质子的横向弛豫时间T2,并作为啶虫脒检测的信号读出。检出限为2.66ng·mL‑1SN=3,n=3。该方法无需洗涤可一步检测啶虫脒,是复杂样品中农药残留检测的有效分析工具。

主权项:1.一种基于AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器的检测方法,其特征在于,①预处理:AChE用Tris-HCl缓冲液溶解稀释,CHO用PBS缓冲液溶解稀释,ACh和神经毒性农药溶液用水配制,在测试之前,AChE和CHO先活化;②标准曲线的绘制:将一系列不同浓度的神经毒性农药溶液,先与适量的预处理过的AChE孵育一段时间,然后依次加入过量的预处理过的ACh和CHO,继续孵育一段时间,再与Fe2+混合一段时间,利用低场核磁共振波谱仪收集T2值,以样品浓度的对数为横坐标,以横向弛豫时间为纵坐标,建立标准曲线,计算得到标准曲线的线性回归方程;③待测样品的测定:将待测样品先与适量的预处理过的AChE孵育一段时间,然后依次加入过量的预处理过的ACh和CHO,继续孵育一段时间,再与Fe2+混合一段时间,利用低场核磁共振波谱仪收集T2值,并将其代入线性回归方程中,计算得到待测样品的神经毒性农药浓度。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 湖北工业大学 一种基于AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器的检测方法和应用

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