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一种具有抑制黄嘌呤氧化酶活性的胖大海提取物及其制备方法、应用 

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申请/专利权人:山东省农业科学院

摘要:本发明属于化合物提取技术领域,具体涉及一种具有抑制黄嘌呤氧化酶活性的胖大海提取物及其制备方法、应用。本发明所提供的胖大海提取物的机构式具体为:。本发明对胖大海的化学成分及其抗黄嘌呤氧化酶活性和体外抗尿酸诱导的炎症的活性开展了深入系统的研究,发现了新的化合物,不仅丰富了化合物研究的范畴,也为胖大海这种药食两用植物进一步在医药学和功能食品方面的应用提供了一定的理论指导,为该植物的深入开发奠定了基础。

主权项:1.一种具有抑制黄嘌呤氧化酶活性的胖大海提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)胖大海粉末在室温下用50%乙醇提取,提取液过滤后减压浓缩,得到无醇味的水提取物;(2)将水提取物中加入95%乙醇,然后用95%乙醇分离水提液中的多糖,离心,倾倒合并上清液,减压浓缩得醇提取物;将醇提取物用蒸馏水稀释,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,分别得到石油醚萃取物部分,乙酸乙酯萃取物部分和正丁醇萃取物部分;(3)胖大海乙酸乙酯提取物通过硅胶柱分离,并用CH2Cl2MeOH逐步洗脱产生六个组分Fr1-Fr6;(4)使用石油醚乙酸乙酯将Fr2于200-300目硅胶柱分离获得两个组分Fr2a和Fr2b;Fr2b经过200-300目硅胶柱和SephadexLH-20分离后,再用半制备型HPLC得到化合物1、化合物4和化合物5;(5)Fr3使用石油醚乙酸乙酯经过硅胶柱分离得到四个组分Fr3a-Fr3d;组分Fr3b在硅胶柱和SephadexLH-20分离后,由半制备HPLC得到化合物6和化合物7;化合物3在甲醇中从Fr3b中结晶出来;(6)Fr4经硅胶柱,用石油醚乙酸乙酯洗脱获得三个组分Fr4a-Fr4c;组分Fr4c再经硅胶柱和SephadexLH-20后,在半制备型HPLC上得到化合物8和化合物9;并且在-20℃石油醚乙酸乙酯溶液中重结晶得到化合物2;(7)使用石油醚乙酸乙酯于硅胶柱中洗脱Fr5获得三个组分Fr5a-Fr5c;Fr5a在硅胶柱和SephadexLH-20上进行分离,得到化合物10和化合物11,然后进行半制备HPLC,得到化合物13;Fr5b经硅胶柱和SephadexLH-20分离得到化合物12;Fr5c同样经过在硅胶柱和SephadexLH-20分离,在半制备型HPLC上分离得到化合物14和化合物17;此外,化合物15和化合物16从Fr5b中结晶出来;所述胖大海提取物的制备方法能够同时获得化合物1-17,具体化合物结构式为: ;步骤(3)中,所述硅胶柱为100-200目;所述逐步洗脱中,CH2Cl2MeOH的体积比为:1001→801→501→201→101→81→61→41→21→11→MA;步骤(4)中,所述石油醚乙酸乙酯的体积比为201-71;所述SephadexLH-20中,MeOHCH2Cl2=11;所述半制备型HPLC的条件为:λ=210-385nm,2.5mLmin;流动相为:化合物1为MA:H2O=65:32,0.3%甲酸;化合物4为MA:H2O=63:37,0.3%甲酸;化合物5为MA:H2O=78:22,0.3%甲酸;步骤(5)中,所述石油醚乙酸乙酯的体积比为101-71;所述SephadexLH-20中,MeOHCH2Cl2=11;所述硅胶柱为200-300目;所述半制备HPLC的条件为λ=210-385nm,2.5mLmin;流动相为:化合物6为MA:H2O=32:68,0.3%甲酸;化合物7为MA:H2O=38:62,0.3%甲酸;步骤(6)中,所述硅胶柱为200-300目;所述石油醚乙酸乙酯的体积比为81-51;所述SephadexLH-20中,MeOHCH2Cl2=11;所述半制备型HPLC的条件为λ=210-385nm,2.5mLmin,流动相:化合物8为MA:H2O=55:45,0.3%甲酸、化合物9为MA:H2O=50:50,0.3%甲酸;步骤(7)中,所述石油醚乙酸乙酯的体积比为81-51;所述SephadexLH-20均采用MeOH;所述半制备HPLC的条件为λ=210-385nm,2.5mLmin,流动相:化合物13为MA:H2O=30:70,0.3%甲酸;化合物14为MA:H2O=30:70,0.3%甲酸;化合物17为MA:H2O=28:72,0.3%甲酸。

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