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申请/专利权人:福州大学
摘要:本发明公开了一种基于EXPAR的无酶指数扩增生物传感器及其应用。该传感器由第一部分EXPAR和第二部分AT‑HCR组成;第一部分EXPAR包括:用于指数放大反应的模板链TP,启动指数放大反应的启动子链P1,NEBuffer缓冲液,ThermoPol缓冲液,Nt.BstNBI切刻内切酶,DNA聚合酶,dNTPs;第二部分AT‑HCR包括:发卡H1,发卡H2,发卡H3,Tris‑HCl缓冲液。该传感器通过第一部分的扩增反应扩增出大量的目标物,然后通过第二部分的杂交链式HCR反应,结合扩增出来的目标物将发夹H1和H2无酶聚合连接形成长链,然后发夹H2的DNAzyme亚基接枝形成未被激活的DNAzyme,裂解底物H3被裂解后的一端用于反向触发激活HCR形成更多的核酸长链,两次放大检测信号,一次循环检测信号,实现了血清中肿瘤标志物的超灵敏检测。
主权项:1.一种基于EXPAR的无酶指数扩增生物传感器,其特征在于:由第一部分EXPAR和第二部分AT-HCR组成;第一部分EXPAR包括:用于指数放大反应的模板链TP,启动指数放大反应的启动子链P1,NEBuffer缓冲液,ThermoPol缓冲液,Nt.BstNBI切刻内切酶,DNA聚合酶,dNTPs;第二部分AT-HCR包括:发卡H1,发卡H2,发卡H3,Tris-HCl缓冲液;其中,模板链TP:5'-CCTGCTCCAAAAATCCATTAACAGACTCTCTGTTAGGAACTGTATCCGAA-P-3',启动子链P1:5'-TCGGATACAGTTCCTAACAGA-3',发卡H1:5'-ATTTTTGGAGCAGGCACACCCTGCTCCAAAAATCCATT-cy5-3',发卡H2:5'-AAACCGAGGCTAGCCGTGTGCCTGCTCCAAAAAiCy3dTAATGGATTTTTGGAGCAGGGTACAACGACGCCTGC-3',发卡H3:5'-AATGGATTTTTGGAGCAGGCGrArUCGGTTTTCCAAATATCCATT-3'。
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百度查询: 福州大学 一种基于EXPAR的无酶指数扩增生物传感器及其应用
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