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一种长片段双链环状核酸的扩增和基因检测方法 

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申请/专利权人:华南理工大学

摘要:本发明公开了一种双链环状核酸扩增方法,包括:将CRISPRRNP复合物与双链环状核酸混合孵育,所述双链环状核酸包括第一链和第二链,所述sgRNA可与所述第一链的靶位点特异性结合,所述sgRNA可切割所述第二链;加入核酸外切酶消化所述第二链,得到缺口链;使CRISPRRNP复合物脱离所述第一链;以所述缺口链为引物,所述第一链为模板,使用聚合酶从所述引物延伸与所述模板互补的核酸,本发明中的双链环状核酸扩增方法特异性强、操作简单,可得到长度较长的单链滚环扩增产物,具有广泛应用前景。

主权项:1.一种双链环状核酸扩增方法,包括:将CRISPRRNP复合物与双链环状核酸混合孵育,所述双链环状核酸包括第一链和第二链,所述CRISPRRNP复合物包括Cas9切口酶和sgRNA,所述Cas9切口酶为具有单侧切割活性的Cas9蛋白,所述sgRNA可与所述第一链的靶位点特异性结合,所述sgRNA可切割所述第二链;加入核酸外切酶消化所述第二链,得到缺口链;使CRISPRRNP复合物脱离所述第一链;以所述缺口链为引物,所述第一链为模板,使用聚合酶从所述引物延伸与所述模板互补的核酸。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 华南理工大学 一种长片段双链环状核酸的扩增和基因检测方法

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