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申请/专利权人：绍兴金箓生物技术有限公司
摘要：本发明提供了一种检测HER2基因扩增新型FISH探针的制备方法及其应用，属于医学检测领域。所述的探针制备工艺属于oligo探针制备法，具体步骤如下：利用分子生物信息学技术对重复序列进行去除，并设计和化学合成长度一致的靶向目的片段的寡核苷酸片段，建立寡核苷酸库，然后扩增和用荧光标记寡核苷酸序列，最后得到用于检测HER2基因扩增的荧光原位杂交探针。本发明开发了步骤简单且低成本的寡核苷酸探针制备工艺，该工艺不受BAC技术的限制，且生产出来探针的长度均一，能够比较轻松地穿透细胞核膜，从而提高杂交效率。此外，该新型探针还具备特异性高、背景低且清晰等特点，适用于临床上乳腺癌的诊断。
主权项：1.一种用于检测HER2基因扩增的新型FISH探针的制备方法，其特征在于，所述制备方法属于oligo探针制备法，包含以下步骤：1确定HER2基因和CEN17位点的探针靶点区域且去除探针靶点区域内的重复核苷酸序列，所述HER2基因探针靶点区域包含HER2基因的编码区以及5’端和3’端的非编码区域；2根据HER2基因CEN17位点探针靶点区域设计并化学合成长度一致的寡核苷酸片段，所述寡核苷酸序列长度为60～240bp；所述寡核苷酸片段包含接头和特异性结合HER2基因CEN17位点探针靶点区域的片段；所述寡核苷酸序列构成寡核苷酸库；3以步骤2中的寡核苷酸库为模板，以步骤2的接头序列为引物进行PCR扩增，得到探针模板库；以探针模板库为模板，使用含有荧光标记的正向、反向引物进行PCR扩增获得以CEN17为内对照，检测HER2基因扩增的原位杂交荧光探针，所述正向、反向引物序列同接头序列。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 绍兴金箓生物技术有限公司 一种检测HER2基因扩增新型FISH探针的制备方法及其应用
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