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申请/专利权人:四川省妇幼保健院
摘要:本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及检测呼吸道非典型病原体核酸的扩增引物对和锁核酸探针、试剂盒应用。该检测呼吸道非典型病原体核酸的锁核酸探针(LNA‑TaqMan探针),具有长度短、熔点高、稳定性好的优点;检测试剂盒中包括5种呼吸道非典型病原体的扩增引物对和锁核酸探针、内标对照、阳性对照、阴性对照、实时荧光定量PCR反应预混液。本发明将锁核酸探针技术与PCR技术融合建立多重荧光定量PCR检测方法,可同时检测包括百日咳鲍特菌、嗜肺军团菌、肺炎衣原体、肺炎支原体、沙眼衣原体在内的5种呼吸道非典型病原体,并且检测灵敏高、特异好、重复性好。
主权项:1.一种检测呼吸道非典型病原体核酸的试剂盒,其特征在于,包括检测呼吸道非典型病原体核酸的扩增引物对和检测呼吸道非典型病原体核酸的锁核酸探针;所述检测呼吸道非典型病原体核酸的扩增引物对包括针对百日咳鲍特菌、嗜肺军团菌、肺炎衣原体、肺炎支原体和沙眼衣原体的扩增引物对;所述百日咳鲍特菌的扩增引物对序列如SEQIDNo.1及SEQIDNo.2所示;所述嗜肺军团菌的扩增引物对序列如SEQIDNo.3及SEQIDNo.4所示;所述肺炎衣原体的扩增引物对序列如SEQIDNo.5及SEQIDNo.6所示;所述肺炎支原体的扩增引物对序列如SEQIDNo.7及SEQIDNo.8所示;所述沙眼衣原体的扩增引物对序列如SEQIDNo.9及SEQIDNo.10所示;所述检测呼吸道非典型病原体核酸的锁核酸探针包括针对百日咳鲍特菌、嗜肺军团菌、肺炎衣原体、肺炎支原体和沙眼衣原体的锁核酸探针;所述百日咳鲍特菌的锁核酸探针的序列如SEQIDNo.11所示,5’端标记的荧光基团是FAM,3’端标记的淬灭基团是BHQ2;所述嗜肺军团菌的锁核酸探针的序列如SEQIDNo.12所示,5’端标记的荧光基团是HEX,3’端标记的淬灭基团是BHQ2;所述肺炎衣原体的锁核酸探针的序列如SEQIDNo.13所示,5’端标记的荧光基团是FAM,3’端标记的淬灭基团是BHQ2;所述肺炎支原体的锁核酸探针的序列如SEQIDNo.14所示,5’端标记的荧光基团是HEX,3’端标记的淬灭基团是BHQ2;所述沙眼衣原体的锁核酸探针的序列如SEQIDNo.15所示,5’端标记的荧光基团是CY5,3’端标记的淬灭基团是BHQ2;所述的扩增引物对分为A、B两组:A组包括百日咳鲍特菌扩增引物对、嗜肺军团菌扩增引物对;B组包括肺炎衣原体扩增引物对、肺炎支原体扩增引物对、沙眼衣原体扩增引物对;所述的锁核酸探针分为A、B两组:A组包括百日咳鲍特菌的锁核酸探针、嗜肺军团菌的锁核酸探针;B组包括肺炎衣原体的锁核酸探针、肺炎支原体的锁核酸探针、沙眼衣原体的锁核酸探针;同一组内的不同的锁核酸探针5’端连接的荧光基团不同。
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百度查询: 四川省妇幼保健院 检测呼吸道非典型病原体核酸的扩增引物对、锁核酸探针、试剂盒及应用
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