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申请/专利权人：上海澳斯康生物制药有限公司
摘要：本申请提供了一种将贴壁Marc145细胞驯化成悬浮细胞的方法，通过潮霉素抗性基因加压筛选得到稳定表达Siat7e基因的抗性细胞株，并在无血清培养基中经过单细胞的驯化实现了全悬浮细胞的增殖，经过有限稀释挑选获得了高产并且可持续性稳定传代生长的全悬浮Marc145单克隆细胞系。本申请的Marc145悬浮细胞在无血清培养基中通过优化谷氨酰胺、谷氨酸、天冬氨酸及天冬酰胺等关键成分，可以有效提高细胞生长细胞密度，悬浮培养可实现最高细胞密度达6.0×106cellsmL~8.0×106cellsmL，本申请的方法为Marc145细胞的悬浮培养以及工业化生产疫苗奠定了基础，也为猪蓝耳灭活疫苗的工业化大生产提供了新的途径。
主权项：1.一种悬浮培养Marc145细胞株的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：构建稳定表达Siat7e基因的贴壁型Marc145细胞株，以及，将所述稳定转染siat7e基因的贴壁型Marc145细胞株驯化培养，将贴壁型Marc145细胞株驯化成悬浮型Marc145细胞株；驯化培养包括依次进行的用含血清培养基进行悬浮驯化的阶段以及用无血清培养基进行悬浮驯化的阶段。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海澳斯康生物制药有限公司 悬浮培养Marc145细胞的方法
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