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猪流行性腹泻病毒弱毒FJzz1株感染性克隆的构建与应用 

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申请/专利权人:中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

摘要:本发明提供一种基于体外连接手段的拯救猪流行性腹泻病毒FJzz1株的反向遗传系统及其应用。通过对其全基因组进行分析,在其全基因组内特有的限制性内切酶酶切位点的基础上,我们将其分为A、B、C、D、E、F和G大小不等的七个片段。随后为提高后续连接效率,我们将这七个小片段整合为AB、CDE和FG三个大片段。利用T7体外转录试剂盒将全长cDNA体外转录为RNA转录本与N基因RNA转录本一起转染至Vero细胞拯救病毒。成功获得了可稳定遗传,且具有遗传标记的rFJzz1弱毒感染性克隆毒株,为后续研究FJzz1株PEDV致病机理和新型疫苗的研制提供了技术平台。

主权项:1.一种基于体外连接手段的拯救猪流行性腹泻病毒FJzz1株的反向遗传系统,其特征在于所述反向遗传系统包括:a改造的载体pBSK;bPEDV基因组全长片段;c包含猪流行性腹泻病毒N基因的辅助质粒。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心) 猪流行性腹泻病毒弱毒FJzz1株感染性克隆的构建与应用

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