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申请/专利权人：福建农林大学
摘要：本发明公开了一种从Raffaelealauricola中提取藿烷型三萜类化合物的方法，包括：活化菌株，初级培养，次级培养，菌体研磨，乙酸乙酯萃取，浓缩得粗提物，将粗提物进行反相硅胶柱层析，以甲醇：水梯度洗脱，再通过多次200‑300目硅胶柱层析纯化，收集洗脱液浓缩，得到目标产物。经1HNMR、13CNMR、COSY、HMBC、HSQC谱图分析证明藿烷型三萜类化合物首次在该菌种代谢物中提取到。
主权项：1.一种从Raffaelealauricola中提取藿烷型三萜类化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将Raffaelealauricola活化后，取菌块接种到PDB培养基中，在160～180rmin、20~28℃条件下连续培养5~10天，按15wt%~20wt%接种量转接到改良的大米培养基中，继续在20～28℃条件下静置培养28～40天；2）将步骤1）得到的菌丝体在35~40℃下干燥后研磨成粉状，用1~2倍体积的乙酸乙酯浸泡12~24小时，超声40~60分钟，收集萃取液，残渣中再加入菌丝体1~2倍体积的乙酸乙酯，超声40~60分钟，收集萃取液，重复以上步骤，共得到三份萃取液合并浓缩得到粗提物浸膏；3）将浸膏用氯仿或二氯甲烷溶解，然后用反相硅胶C18进行拌样，干法装柱，以甲醇：水自体积比为1:9梯度洗脱，收集甲醇：水体积比为9:1部分洗脱液，旋蒸浓缩得组分A；4）用1倍体积的氯仿溶解组分A，过200-300目硅胶柱，石油醚：乙酸乙酯体积比为30:1开始梯度洗脱，收集石油醚：乙酸乙酯体积比为10:1部分洗脱液，旋蒸浓缩得浸膏，再过200-300目硅胶柱，以石油醚：氯仿体积比为8:1开始梯度洗脱，收集石油醚:氯仿体积比为4:1部分洗脱液，再过200-300目硅胶柱层析，以石油醚：乙酸乙酯体积比为20:1开始梯度洗脱，收集石油醚：乙酸乙酯体积比为6:1部分洗脱液，旋蒸得到白色粉末状藿烷型三萜类化合物；所述步骤1）中改良的大米培养基：大米100g，木屑10g，加入纯水120mL，121℃高压灭菌，20min；所述藿烷型三萜类化合物的结构式如下： 。
全文数据：
权利要求：
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