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摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种在受精卵期导入特异mRNA制作GHR‑KO微型猪的方法。本发明利用显微注射方法在小型猪受精卵中导入靶向猪GHR第6外显子的gRNA及CRISPRCas9mRNA，再把注射成功的受精卵移入受体母猪体内完成妊娠。通过对出生猪仔GHR基因型鉴定，最终获得敲除GHR基因的小型猪个体。本发明所构建的方法是一种有效、快捷的技术方法，该方法导入mRNA而非传统DNA分子，可以避免GHR敲除小型猪出现嵌合体的弊端，大大提高获得超小型、小型猪的效率，大幅度缩减经费支出。得到的超小型、小型猪也将为后续研究者开展动物生长发育机制研究和小型猪疾病模型的创制提供重要材料。
主权项：1.一种在受精卵期导入特异mRNA制作GHR-KO微型猪的方法，其特征在于，所述方法为：1根据猪GHR基因序列，设计靶向敲除猪GHR第6外显子的gRNA；2然后体外制备、纯化gRNA和CRISPRCas9mRNA，并利用显微注射技术将其导入微型猪受精卵中；3把注射成功的受精卵移入受体母猪体内完成妊娠，通过对出生猪仔GHR基因型鉴定，获得敲除GHR基因的微型猪个体。
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百度查询： 深圳市华大农业应用研究院 一种在受精卵期导入特异mRNA制作GHR-KO微型猪的方法
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