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申请/专利权人:中国科学院天津工业生物技术研究所
摘要:本发明公开了一种碳链延长酶BAL变体及其应用。本发明提供的碳链延长酶BAL变体为甲醛转化蛋白变体,具体为将原始甲醛转化蛋白进行点突变后所得;所述原始甲醛转化蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示;所述甲醛转化蛋白变体的氨基酸序列与SEQIDNo.1相比,具有或仅具有1‑9个点突变。本发明通过对甲醛转化蛋白FLS进行分子改造获得该酶的突变体,大大提高了甲醛缩合产生1,3‑二羟基丙酮的效率。
主权项:1.甲醛转化蛋白变体,其特征在于:所述甲醛转化蛋白变体为将原始甲醛转化蛋白进行点突变后所得;所述原始甲醛转化蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示;所述甲醛转化蛋白变体的氨基酸序列与SEQIDNo.1相比,具有或仅具有如下A1-A7任一所示突变:A1单突变:H483R、F484R、F484A、F484L、F484Y、F484W、L487H、L487S、L487A、L487G、L487Q、L487K、L487R、L487N、L487E;A2四突变:H21R+E367G+I28L+F484W、H21R+E367G+V423A+F484W或I28L+T90L+N283H+F484W;A3五突变:I28L+T90L+N283H+F484W+F425M、I28L+T90L+N283H+F484W+F425L或I28L+T90L+N283H+F484W+P548D;A4六突变:I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+N568S、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+A334T、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+D46N、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+R89W、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+T222A、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+S365G、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+I555V、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+V423A、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+T333A、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+H188R、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+C306R、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+V451I、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+A148V、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+L487H、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+L487S、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+L487A、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+L487G、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+L487Q、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+L487K、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+L487R、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+L487N或I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+L487E;A5七突变:I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+H21R+P491L、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+H188R、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+T333A、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+C306R+M167T、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+C306R+H188R、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+V423A+M167T或I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+V423A+H188R;A6八突变:I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+T333A+H188R、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+A334T+H188R、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+T333A+A334T、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+C306R+M167T+H188R、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+C306R+M167T+A334T、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+AC306R+T333A+A334T、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+V423A+M167T+A334T、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+V423A+H188R+A334T、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+V423A+T333A+A334T、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+H188R+T333A、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+H188R+L556Q、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+H188R+L104P、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+H188R+Y570H、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+H188R+F571S、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+H188R+L198Q、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+H188R+K203R、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+H188R+G281R、I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+H188R+E367D或I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+H188R+I555T;A7九突变:I28L+T90L+N283H+F484W+F425M+M167T+H188R+H286Q+V423A。
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