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申请/专利权人：上海奥博生物医药股份有限公司
摘要：本发明公开了南极假丝酵母脂肪酶PAL和玉米丝黑穗病菌脂肪酶SRL突变体及其在不对称水解二酯底物制备系列光学纯产物中的应用。本发明利用半理性设计思路，通过对脂肪酶三维结构分析，考察了系列氨基酸位点对对映体选择性的影响；进一步对正向突变位点进行组合构建系列组合突变体，应用于不对称水解工艺，在室温10‑40℃和纯水相条件下制备系列S‑单酯产物，e.e.95％，克服了野生型脂肪酶只能在较低温度和添加助溶剂的条件下才能达到较高选择性的局限，为脂肪酶不对称水解制备医药中间体产业化奠定基础。
主权项：1.一种玉米丝黑穗病菌脂肪酶突变体，其特征在于所述突变体相对于野生型玉米丝黑穗病菌脂肪酶其氨基酸序列如SEQIDNO:3所示，将第145位亮氨酸残基突变为缬氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、甘氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、脯氨酸、组氨酸或赖氨酸；或将第159位缬氨酸残基突变为丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、苏氨酸、谷氨酰胺或酪氨酸；或将第287位丙氨酸残基突变为异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、丝氨酸、半胱氨酸或苏氨酸，或将第288位甘氨酸残基突变为缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺、赖氨酸、酪氨酸或精氨酸，或将以上突变位点的有益突变形式的任意组合。
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百度查询： 上海奥博生物医药股份有限公司 脂肪酶突变体及其应用
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