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摘要:本发明涉及一种可溶性fms样酪氨酸激酶‑1检测试剂盒及其制备方法与应用,发明人采用双抗体夹心法联合磁微粒化学发光技术对可溶性fms样酪氨酸激酶‑1进行检测,并发现采用发明人优化后的免疫微磁粒制备方法,制备得到的胎盘生长因子捕获抗体磁微粒与发明人进一步通过特定比例交联剂DTBP、DTT和封闭剂MMTS制备得到的碱性磷酸酶标记的胎盘生长因子检测抗体,所形成的一种可溶性fms样酪氨酸激酶‑1化学发光免疫检测试剂盒,能以全自动化学发光免疫分析仪为检测工具,自动完成检测,同时其检测性能还显著提高,检测灵敏度达到0.97pgmL,检测线性范围宽,能达到10pgmL~85000pgmL。预示其具有广阔的检测应用前景。
主权项:1.一种可溶性fms样酪氨酸激酶-1化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,包括碱性磷酸酶标记的可溶性fms样酪氨酸激酶-1检测抗体和可溶性fms样酪氨酸激酶-1捕获抗体磁微粒,其中,所述碱性磷酸酶标记的可溶性fms样酪氨酸激酶-1检测抗体的制备方法包括如下步骤:(1)蛋白活化:利用交联剂对蛋白进行活化处理,所述蛋白为可溶性fms样酪氨酸激酶-1单克隆抗体,所述交联剂选自SPDP、DTBP、DTSSP、AMAS中的任意一种;(2)化学发光物活化:利用二硫苏糖醇对化学发光标记物进行活化处理,所述化学发光标记物为碱性磷酸酶;(3)偶联:将步骤(2)中活化后的碱性磷酸酶与步骤(1)中活化后的可溶性fms样酪氨酸激酶-1单克隆抗体,混合,孵育,得到化学发光标记物-蛋白偶联物;(4)封闭:在所述步骤(3)得到的化学发光标记物-蛋白偶联物中加入封闭剂进行封闭,得到化学发光标记物-蛋白偶联终产物,所述封闭剂为MMTS。
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百度查询: 广州万孚生物技术股份有限公司 一种可溶性fms样酪氨酸激酶-1检测试剂盒及其制备方法与应用
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