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一种eIF2α的突变体、突变体细胞及制备方法和应用 

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申请/专利权人:南方科技大学

摘要:本发明提出了一种eIF2α的突变体、突变体细胞及制备方法和应用,以包含SEQIDNO.1所示的eIF2α的氨基酸序列的质粒为模板,利用引物对进行PCR扩增,得到所述eIF2α的突变体S52A;再获取所述的瞬时表达eIF2αS52A的细胞,离心,根据细胞的鲜重,加入缓冲液重悬,在冰浴环境中破碎细胞,离心,使细胞破碎物沉淀,即得到真核细胞裂解上清液;使蛋白不被磷酸酶磷酸化从而活性不被抑制;优化了现有制备真核细胞裂解上清液的方法;构建一种体外翻译体系,使用瞬时表达eIF2αS52A的细胞裂解上清液以提高翻译的活性。

主权项:1.一种eIF2α的突变体,其特征在于,所述eIF2α的氨基酸序列为SEQIDNO.1所示,所述eIF2α的编码基因的核苷酸序列为SEQIDNO.2所示。

全文数据:

权利要求:

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