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申请/专利权人：广东君睿生物技术研究有限公司

摘要：本发明公开了一种用纯化天然补体C1q制备补体C1q多克隆抗体的方法，以免疫学抗原抗体反应的凝集类反应、补体结合类反应原理为依托，通过有机结合抗原抗体的凝集反应技术、补体结合反应技术、乳胶微球凝集反应技术或红血球凝集反应等技术，及动物免疫技术、抗原与抗体纯化等技术，获得高浓度、高纯度天然补体C1q及制备天然补体C1q多克隆抗体的可产业化、批量化制备新技术。特别是用于纯化的天然补体C1q主要来源于豚鼠等各种天然补体含量丰富的物种，或猪、牛、羊、鸡、鸭等易于获得的广泛饲养动物。

主权项：1.一种用纯化天然补体C1q制备补体C1q多克隆抗体的方法，其特征在于，主要利用凝集类抗原抗体反应联合补体结合反应提取并纯化获取可产业化生产的天然补体C1q，包括：a、用具有良好试管凝集试验反应性的细菌菌体抗原，与合适动物的相应阳性血清按最适浓度进行凝集反应，并加入适量提供补体C1q的灭活血清进行补体结合反应的第一步反应，该反应除C1q结合抗原抗体结合物外，因灭活而不会出现补体的其它系统性反应，避免了补体MAC等结合菌体抗原的可能，从而将目标物天然补体C1q结合到凝集反应颗粒上，形成菌体抗原+相应抗体+补体C1q的免疫反应结合物，用离心方法将此颗粒性免疫反应结合物纯化，用于进一步纯化天然补体C1q用的免疫抗原；b、用所述免疫抗原的免疫动物获得含高效价补体C1q多克隆抗体的高免血清，此高免血清中含有高效价的补体C1q抗体及菌体抗原相应抗体，其中免疫用动物种类与所述阳性血清来源动物相同，以避免阳性血清中的抗体作为免疫原，增加对免疫目的C1q抗体的纯化干扰；c、所述的菌体抗原与所述的高免血清，通过凝集试验吸收法及离心分离方法，弃掉凝集反应物，以去除相应的菌体抗体，则剩余抗体为以补体C1q为主的抗体，用盐析法技术纯化吸收后的剩余抗体，获得高浓度和高纯度的补体C1q抗体，用于进一步纯化天然补体C1q；d、所述的高浓度和有较高纯度的补体C1q抗体，链接免疫动物后不产生免疫抗体反应的颗粒物，作为凝集试验中抗体使用与所述提供补体的血清作凝集试验，充分反应后用离心方法分离凝集反应结合物，此结合物含有补体C1q抗体与链接的颗粒物及凝集反应结合的高浓度天然补体C1q，获得最终免疫用的含有免疫惰性物与高纯度和高浓度天然补体C1q。

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