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检测PDCoV的RT-RAA-LFD引物对、探针、试纸条、试剂盒及其应用 

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申请/专利权人:中国农业大学

摘要:本发明涉及动物疫病检测技术领域,具体涉及检测PDCoV的RT‑RAA‑LFD引物对、探针、试纸条、试剂盒及其应用。本发明以PDCoV的ORF1b基因为诊断靶标,设计、筛选、优化并最终获得了能够特异性检测PDCoV核酸的引物对与探针。使用本发明的引物对、探针、试剂盒和试纸条可以实现对PDCoV的快速检测,等温扩增所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行结果判读。整个检测过程无需昂贵的仪器设备,仅通过肉眼判读即可获得检测结果。本发明在基层和现场快速检测与甄别PDCoV感染方面具有广阔的应用前景。

主权项:1.一种基于RT-RAA-LFD技术检测PDCoV的方法,所述方法为非疾病治疗和诊断目的,其特征在于,包括:以待测样品中提取的RNA为模板,使用RT-RAA-LFD检测试剂盒,40℃恒温扩增10min,获得扩增产物,采用检测试纸条对所述扩增产物进行可视化判读;结果判定标准为:阳性结果出现两条红色条带,一条位于检测线,另一条位于质控线;阴性结果仅在质控线出现一条红色条带,而在检测线无红色条带出现;若仅检测线出现红色条带,而质控线不出现红色条带,则为无效检测结果;RT-RAA-LFD检测试剂盒中含有的正向引物序列如SEQIDNO.3所示;探针序列如下:5’-Biotin-GGTCCAGAGTACCGCTGTGAGGAGCCGCTTG[THF]TAAATTAGTAGGAGT-Phosphorylation-3’;反向引物序列如下:5’-FAM-ACGTGTTAGGAACATATTATGATACGCATC-3’。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国农业大学 检测PDCoV的RT-RAA-LFD引物对、探针、试纸条、试剂盒及其应用

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