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一种灵敏的AChE酶活性检测方法 

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申请/专利权人:陕西屹凝环保科技有限公司

摘要:本发明公开了一种灵敏的AChE活性检测方法,属于环境检测领域。选择最合适的ACh与AChE的投加比例,以使得在没有抑制剂的情况下酶促反应结束后,能够水解掉百分之九十左右的ACh。酶促反应进行时,将溶液的pH调至7.8‑8左右,以保证最佳的酶反应条件,酶促反应后,将待测试样的PH值调至2.3~2.7,以终止酶促反应并获得良好的ACh出峰条件。酶促反应的终止是通过淬灭AChE进行的,原因是ACh作为底物,将AChE淬灭后,ACh的量不再改变,淬灭AChE即可终止酶促反应。本发明方法能够用于低浓度农药和水质检测。

主权项:1.一种灵敏的AChE酶活性检测方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1)配制流动相;之后采用梯度洗脱法对乙酰胆碱进行分离;步骤2)将6.5×10-4UmL~7.5×10-4UmL的AChE加入处理好的待测样品中反应,待测样品中含有浓度至少为0.3ugL的抑制剂,之后向反应体系中加入浓度为90~110μgL的ACh进行酶促反应,得到混合溶液,分别将酶促反应前后的混合溶液的pH调节为2.3~2.7,以进行淬灭反应,然后检测酶促反应前后混合溶液中的ACh含量。

全文数据:

权利要求:

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