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一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法 

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申请/专利权人:南京林业大学

摘要:本发明公开了一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法,涉及植物培育技术领域,包括对泰山红石榴愈伤组织诱导分化培养得到丛生芽,再将丛生芽进行二次培养得到幼苗;其中:愈伤组织诱导分化培养采用诱导分化培养基;所述诱导分化培养基中引入了亚麻籽与葛根混合提取物;本发明采用了泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法来进行泰山红石榴的繁殖,本发明的方法能够有效保持亲本优良遗传特性。为了提高愈伤组织的诱导率以及胚状体的分化率,本发明通过对诱导分化培养基进行了优化,通过对诱导分化培养基成分进行了大量的优化调整,以及各成分的用量配比的调整,使得采用诱导分化培养基能够更有效的促进泰山红石榴愈伤组织的分化培养。

主权项:1.一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法,其特征在于,包括对泰山红石榴愈伤组织诱导分化培养得到丛生芽,再将丛生芽进行二次培养得到幼苗;其中:愈伤组织诱导分化培养采用诱导分化培养基;所述诱导分化培养基中引入了亚麻籽与葛根混合提取物;所述对泰山红石榴愈伤组织诱导分化培养以泰山红石榴叶片为外植体;所述外植体具体处理为:将泰山红石榴叶片切成0.7cm×0.7cm大小的块状叶片,近轴面朝上,接种在诱导分化培养基中进行愈伤诱导和不定芽分化;所述诱导分化培养基按重量份计包括以下成分制成:硝酸钾42-46份、硝酸铵50-55份、硫酸锌0.4-0.46份、磷酸二氢钾2-4份、硫酸亚铁0.1-0.2份、硫酸镁6-8份、黄腐酸钠0.1-0.3份、烟酸0.02-0.05份、氯化钴0.001-0.003份、氯化钙2-3份、乙二胺四乙酸二钠0.08-0.12份、硼酸0.11-0.18份、硫酸锰0.5-0.6份、萘乙酸0.02-0.05份、肌醇0.05-0.09份、吲哚乙酸0.015-0.018份、蔗糖0.3-0.5份、卡拉胶40-46份、琼脂粉12-15份、亚麻籽与葛根混合提取物0.1-0.3份,所述诱导分化培养基的pH为6.0-6.5;所述亚麻籽与葛根混合提取物制备方法为:首先,将亚麻籽与湿沙混合在一起,置于28℃温度下,放置10天,然后取出,清洗干净;将清洗干净后的亚麻籽、葛根混合到一起,然后进行粉碎,得到混合粉碎料;将上述得到的混合粉碎料、乙醇溶液进行混合,然后再以1500rmin转速搅拌4小时,再进行超声波处理10min,静置1小时后,进行离心处理,过滤,去除滤渣,得到滤液;将滤液再进行过0.21um微孔滤膜处理,得到复滤液;对复滤液进行喷雾干燥,得到亚麻籽与葛根混合提取物;所述亚麻籽与湿沙按1:30质量比例混合;其中湿沙含水量为20%;所述亚麻籽、葛根混合质量比为1:1-3;所述混合粉碎料、乙醇溶液混合比例为34g:120mL;所述乙醇溶液质量分数为70%;所述超声波频率为45kHz。

全文数据:

权利要求:

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