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申请/专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，涉及一种敲除猪ARP2基因的sgRNA和ARP2基因敲除细胞系的构建方法。合成针对ARP2基因的带有酶切位点的向导RNA及其互补序列，利用碱基互补配对原则将sgRNA及其互补序列连接为双链片段，通过分子克隆重组技术构建重组CRISPRCas9质粒，转染到猪肺上皮细胞Porcinepulmonaryepithelialcell中，验证sgRNA活性，再通过嘌呤霉素药物筛选阳性单细胞克隆株，提取单细胞克隆株的DNA和蛋白质，进行ARP2基因测序及蛋白表达检测，最后获得ARP2基因敲除的PPE细胞系。具有简便、高效、快速、低成本等特点。
主权项：1.一种敲除ARP2基因的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。
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百度查询： 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心) 一种敲除ARP2基因的sgRNA和ARP2基因敲除细胞系的构建方法
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