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一种高稳定性枯草芽孢杆菌工程菌株及其构建方法和应用 

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申请/专利权人:淮阴工学院

摘要:本发明公开了一种高稳定性枯草芽孢杆菌工程菌株及其构建方法和应用,所述高稳定性枯草芽孢杆菌工程菌株以枯草芽孢杆菌感受态细胞为出发菌株,导入所述的枯草芽孢杆菌自溶基因抗性敲除质粒载体获得。本发明通过构建抗性敲除载体,并转化进荧光标记的枯草芽孢杆菌获得突变菌株,由突变菌株所制备的孢子经过荧光显微镜观察其稳定性,并通过流式细胞仪检测其荧光强度,可发现本发明中构建的高稳定性枯草芽孢杆菌所制备的孢子稳定性得到显著提高,敲除自溶基因后荧光标记芽孢的发光率和存活时间都有显著提高,可应用为一种新型稳定纳米材料。

主权项:1.一种枯草芽孢杆菌自溶基因抗性敲除质粒载体,其特征在于,所述枯草芽孢杆菌自溶基因抗性敲除质粒载体以质粒PUC19为载体,其上含有红霉素抗性基因、氯霉素抗性基因、新霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因中的任意一种,并包含八种枯草芽孢杆菌自溶相关基因及其上游基因中的任意一种,所述八种枯草芽孢杆菌自溶相关基因及其上游片段分别为肽聚糖水解酶CWLH基因及上游基因片段、孢子皮质裂解酶SLEB基因及上游基因片段、β-N-乙酰葡糖胺苷酶LytD基因及上游基因片段、N-乙酰胞壁氨酰基-L-丙氨酸酰胺酶CwlD基因及上游基因片段、孢子皮层细胞壁水解酶cwlJ基因及上游基因片段、肽聚糖内肽酶LytF基因及上游基因片段、N-乙酰胞壁酰基-L-丙氨酸酰胺酶CwlC基因及上游基因片段、sigma-70家族RNA聚合酶sigma因子XPF基因及上游基因片段,序列分别如SEQIDNO.1-8所示。

全文数据:

权利要求:

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