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申请/专利权人：国药(武汉)医学实验室有限公司;国药(武汉)精准医疗科技有限公司
摘要：本申请提供了一种cotDNA及其制备方法和应用，属于分子生物学技术领域，包括以下步骤：获取物种基因组DNA；针对基因组DNA的重复序列设计sgRNA；利用sgRNA，通过CRISPRCas9技术对基因组DNA的重复序列进行特异性的切割，得到产物；将产物进行纯化，得到CotDNA。本申请的一种cotDNA的制备方法相比于目前常用的CotDNA制备方法，减少了打断、变性、退火和消化等实验流程，可更快速地制备出CotDNA，提高制备效率，且提高了产量。本申请的一种cotDNA的制备方法利用sgRNA，通过CRISPRCas9技术对基因组DNA的重复序列进行特异性的切割，可以特异性切割重复序列的位点，使制备的CotDNA中重复序列的含量更高。
主权项：1.一种cotDNA的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、获取物种基因组DNA；S2、针对所述基因组DNA的重复序列设计sgRNA；所述sgRNA靶序列符合5’-N20NGG-3’的序列排列规则，其中N20表示20个连续的碱基，其中每个N表示A或T或C或G，符合所述规则的靶序列位于正义链或反义链；所述sgRNA靶序列为序列表中SEQIDNO：1～50所示；S3、利用所述sgRNA，通过CRISPRCas9技术对所述基因组DNA的重复序列进行特异性的切割，得到产物；切割后得到的所述产物中含有50-300bp大小的重复序列；所述基因组DNA为人基因组中Alu和Kpn基因；S4、将所述产物进行纯化，得到CotDNA。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 国药(武汉)医学实验室有限公司 国药(武汉)精准医疗科技有限公司 一种cot DNA及其制备方法和应用
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