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申请/专利权人：江苏知至生物科技有限公司

摘要：本发明提供基于多肽‑发夹DNA偶联物构建的抗污染光电化学DNA传感器，涉及HIV检测技术领域，抗污染光电化学DNA传感器检测过程包含PDATCPPCOF‑V光电极制备、偶联物LZP‑hDNA制备、核酸探针pDNA‑AgInS2制备、抗污染DNA传感器构建以及光电化学测试，本发明利用点击反应将‑N3叠氮基团修饰的线性两性离子肽LZP和3’‑二苯并环辛炔DBCO修饰的发夹DNAhDNA反应形成LZP‑hDNA偶联物，该偶联物不仅起到了抗污染的效果，hDNA的存在还有利于λ‑Exo辅助的目标循环放大反应的进行，通过在COF‑V电极上修饰内消旋‑四4‑羧基苯基卟啉TCPP和聚多巴胺PDA的复合材料，制备了PDATCPPCOF‑V三元复合光电极，将其充当传感平台的信号转换器并牢固地锚定LZP‑hDNA偶联物。

主权项：1.基于多肽-发夹DNA偶联物构建的抗污染光电化学DNA传感器，所述抗污染光电化学DNA传感器检测过程包含PDATCPPCOF-V光电极制备、偶联物LZP-hDNA制备、核酸探针pDNA-AgInS2制备、抗污染DNA传感器构建以及光电化学测试，其特征在于：所述PDATCPPCOF-V光电极的制备包括以下步骤，Sp1、PDATCPPCOF-V光电极制备时先将40mg的1,3,5-三4-氨苯基苯和32mg的1,4-二醛基-2,5-二乙烯基苯溶于20mL乙腈中；Sp2、往溶液中加入4mL12M的乙酸作为催化剂；Sp3、将Sp2中得到的溶液振荡30s并静置72h，利用离心机对溶液进行离心，并将沉淀物收集，之后利用四氢呋喃和乙醇充分洗涤，后续将其置于60℃下真空干燥，从而获得最终产物COF-V；Sp4、根据Sp3步骤得到COF-V后，称取5mgCOF-V粉末分散于10mL去离子水中，超声处理30min后，获得0.5mgmL分散均匀的COF-V悬浮液，将20μL0.5mgmL的COF-V悬浮液均匀分散在修饰面积为0.25cm2的ITO基底电极上，室温下自然晾干，以此获得COF-V修饰电极；Sp5、将5mgTCPP和10mgDA溶于5mLTris-HCl缓冲液10mM，pH8.5中，通过超声使TCPP充分溶解；Sp6、将20μL该溶液分散在COF-V修饰电极上，保持在黑暗环境中静置30min，使DA充分自聚合，最后用去离子水洗涤电极，获得所需的PDATCPPCOF-V电极。

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