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申请/专利权人：集美大学
摘要：本发明提供了一种水解东莨菪苷的重组β‑葡萄糖苷酶的制备方法和应用，该方法包括：通过对黑曲霉来源的β‑葡萄糖苷酶的基因组中的β‑葡萄糖苷酶进行系统进化分析；以PUC‑57‑An‑bgl3‑Amp质粒为模板，SEQIDNO：3和SEQIDNO：4所示的序列为引物进行PCR扩增，再将扩增产物与pPIC9K质粒连接，转化至毕赤酵母SMD1168中，获得重组菌株，重组菌株诱导表达，即获得重组β‑葡萄糖苷酶。由此可制备专一性转化东莨菪素的重组β‑葡萄糖苷酶，可用于酶法处理植物组织及其初提取物，专一性转化东莨菪苷为东莨菪素，从而增加东莨菪素的提取得率及纯度。
主权项：1.重组β-葡萄糖苷酶的用途，其特征在于，用于水解东莨菪苷生成东莨菪素；所述重组β-葡萄糖苷酶的制备，包括以下步骤：（1）利用NCBI数据库从genebank中搜索，得到16条黑曲霉CBS513.88来源β-葡萄糖苷酶序列，对其进化树分析，并以东莨菪苷为底物进行分子对接，筛选出核苷酸序列如SEQIDNO：1所示，氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的β-葡萄糖苷酶An-bgl3；（2）以PUC-57-An-bgl3-Amp质粒为模板，SEQIDNO：3和SEQIDNO：4所示的序列为引物进行PCR扩增，再将扩增产物与pPIC9K质粒连接，转化至毕赤酵母SMD1168中，获得重组菌株，重组菌株诱导表达，即获得重组β-葡萄糖苷酶。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 集美大学 一种水解东莨菪苷的重组β-葡萄糖苷酶的制备方法和应用
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