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摘要：本发明属于基于核酸分析的分析生物学检测应用技术领域，公开了一种基于单碱基延伸反应的熔解测定方法及应用，该方法根据DNA序列，设计特异性引物，延伸引物紧邻待测位点5'端，通过添加4种不同的ddNTP，引物延伸1个碱基即终止，通过高分辨熔解技术进行分析，通过读取熔解曲线位置、熔解温度变化对延伸碱基进行判别。本发明解决了现有技术中单碱基延伸反应检测时需要大型仪器和专业化的操作，制样复等问题，能够实现DNA序列的快速鉴别和分析，具有广泛的实际应用潜力。
主权项：1.一种基于单碱基延伸反应的DNA熔解测定方法，其特征在于，包括以下步骤：1以具有突变位点的DNA序列为模板，在其临近突变位点处设计特异性延伸引物并标记荧光基团，使得引物延伸一个ddNTP碱基即终止；2加入聚合酶和四种ddNTP进行单碱基延伸反应；3进行高分辨熔解，熔解结束读取熔解温度变化，基于熔解温度变化区间可判断延伸碱基类型。
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百度查询： 陕西科技大学 一种基于单碱基延伸反应的DNA熔解测定方法及应用
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