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摘要：本发明属于基于多重核酸分析的生物学检测技术领域，公开一种基于PfAgo的多重核酸扩增熔解检测方法及试剂盒，该方法通过将PfAgo蛋白的可编程性、单碱基专一性和多周转裂解活性与PCR和RPA扩增相结合，利用PfAgo特异性酶切前后DNA片段长度和GC比例发生改变，从而导致的Tm值发生改变，进行熔解检测实验，并用荧光染料或荧光标记来表征熔解峰，实现多重核酸的检测。该方法克服了多重检测时荧光基团的多重检测数量受限、非特异性扩增及熔解温度相近的扩增产物难区分的问题，实现了多重、特异性、灵敏检测，为多重核酸检测提供一种简单、通用、经济高效的解决方案，具有广泛应用潜力。
主权项：1.一种基于PfAgo的多重核酸扩增熔解检测方法，其特征在于：利用PfAgo蛋白对PCRRPA扩增产物进行切割，切割得到的DNA片段长度和GC比例发生改变，从而导致Tm值发生改变，通过进行熔解检测实验，并用荧光染料或荧光标记来表征熔解峰，实现多重核酸的检测。
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百度查询： 陕西科技大学 基于PfAgo的多重核酸扩增熔解检测方法及试剂盒
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