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一种扩增鲨鱼单域抗体核酸文库的引物与应用 

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申请/专利权人:浙江理工大学

摘要:本发明公开了一种扩增鲨鱼单域抗体核酸文库的引物与应用,涉及生物技术领域,其技术要点为:所述鲨鱼单域抗体核酸文库引物包括一轮引物和二轮引物;所述一轮引物和二轮正向引物F和反向引物R的核酸序列分别如序列表所示。本发明在NCBI与IMGT两大数据库中所有软骨鱼产生的IgNAR抗体序列的基础上,通过比较信号肽区、FR1区、FR4区、CH1区的序列,找出保守片段并加入噬菌粒载体片段,设计出了10条正向,6条反向建库巢式引物。通过本发明中的引物,噬菌体建库后库容大于1×109,对各类天然单域抗体及抗原特异性单域抗体的筛选效果好,测序的正确率达到95%以上。

主权项:1.一种扩增鲨鱼单域抗体核酸文库的引物,其特征是:包括一轮引物和二轮引物,所述一轮引物包括以下3条引物中的至少1条:IgNAR-F9:GTTATTACTCGCGGCCCAACCGGCCATGGCCCTTTCRKKCCTTTCAACCWGGTTACCAAATG;IgNAR-R5:GGTGATGGTGCTGGCCGCGGTGGCCACTAGTGAAATCCRTTTGCYCTCTGTTCTTC;IgNAR-R7:GGTGATGGTGCTGGCCGCGGTGGCCACTAGTCCTCTCTGTTCTTCRGTTGCAGAGT;所述二轮引物包括以下13条引物中的至少1条:IgNAR-F1:GTTATTACTCGCGGCCCAACCGGCCATGGCCACAAAAGAGACGGACGAATC;IgNAR-F2:GTTATTACTCGCGGCCCAACCGGCCATGGCCACAAGAGTAACTCAAACACC;IgNAR-F3:GTTATTACTCGCGGCCCAACCGGCCATGGCCGCATGGGTAGACCAAACACC;IgNAR-F4:GTTATTACTCGCGGCCCAACCGGCCATGGCCCTGCTCGAGTGGACCAAACA;IgNAR-F5:GTTATTACTCGCGGCCCAACCGGCCATGGCCGCWYGRGTGGACCAAACACC;IgNAR-F6:GTTATTACTCGCGGCCCAACCGGCCATGGCCACAAGRGTARMYCAAACACC;IgNAR-F7:GTTATTACTCGCGGCCCAACCGGCCATGGCCGCTCGAGTGGAYCAAACACC;IgNAR-F8:GTTATTACTCGCGGCCCAACCGGCCATGGCCRCAWGGGTRGACCAAACACC;IgNAR-F10:GTTATTACTCGCGGCCCAACCGGCCATGGCCTCAAGGATTGATCAAAAACCGAGA;IgNAR-R6:GGTGATGGTGCTGGCCGCGGTGGCCACTAGTTTTCACGGTCAGTCCGGTGCCAGTT;IgNAR-R8:GGTGATGGTGCTGGCCGCGGTGGCCACTAGTCACAGTCAGAATGGTGCCGCC;IgNAR-R9:GGTGATGGTGCTGGCCGCGGTGGCCACTAGTCACAGTCAGAAYGGTGCCRCT;IgNAR-R10:GGTGATGGTGCTGGCCGCGGTGGCCACTAGTCACTGCCAGAAAAGTGCCTCT。

全文数据:

权利要求:

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