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申请/专利权人:广西科技大学
摘要:本发明公开了一种基于可脱落DNAzyme修饰的基因组5hmC比色检测方法,包括如下步骤:将两条巯基修饰的寡核苷酸链修饰至金纳米粒子AuNPs上,将其制成均相分散溶液;将DNAzyme修饰到生物素化DNA的5hmC位点上;将待测DNA与链霉亲和素磁珠结合;设计一种DNA连接链,其含有两条巯基修饰的寡核苷酸链互补序列、DNAzyme识别序列和切割位点碱基;取两种均相分散溶液、DNA连接链混合,制得AuNPs聚集溶液;将结合有待测DNA样品的链霉亲和素磁珠,用紫外光照射,加入AuNPs聚集溶液,检测比色信号。本发明将5hmC含量信息转化为DNAzyme活性信息,提高检测灵敏度,降低所需样品量。
主权项:1.一种基于可脱落DNAzyme修饰的基因组5hmC比色检测方法,其特征在于,包括如下步骤:1将两条巯基修饰的寡核苷酸链分别修饰至金纳米粒子AuNPs上,形成两种金纳米修饰粒子,并将其分别制成两种均相分散溶液;2将待测DNA样品进行生物素化,然后将DNAzyme修饰到生物素化的DNA中的5hmC位点上;加入链霉亲和素磁珠,使待测DNA与链霉亲和素磁珠结合,以去除未参加修饰的DNAzyme;3设计一种DNA连接链,其含有步骤1所述的两条巯基修饰的寡核苷酸链的互补序列、DNAzyme的识别序列和切割位点RNA碱基;取一定量的步骤1制得的两种均相分散溶液、DNA连接链进行混合,制得AuNPs聚集溶液;4将结合有待测DNA样品的链霉亲和素磁珠,用紫外光照射,加入步骤3制备的AuNPs聚集溶液,获得检测体系,针对检测体系检测比色信号。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 广西科技大学 基于可脱落DNAzyme修饰的基因组5hmC比色检测方法
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