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一种基于CRISPR-Cas12a检测禽腺病毒FAdV-4的体系及试剂盒、应用 

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申请/专利权人:华南农业大学;岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心

摘要:本申请属于生物领域,公开了一种基于CRISPR‑Cas12a检测禽腺病毒FAdV‑4的体系,体系中包含有分别针对禽腺病毒FAdV‑4的Fiber2基因和Hexon基因设计得到的第一RPA引物对和第二RPA引物对、Cas12a蛋白、crRNA‑Fiber2、crRNA‑Hexon、ssDNA‑reporter;此外,本申请还公开了一种基于CRISPR‑Cas12a检测禽腺病毒FAdV‑4的试剂盒,包含有上述体系外,还包含有Buffer、RNase‑freeH2O、RnaseInhibitor以及DNA质粒。

主权项:1.一种基于CRISPR-Cas12a检测禽腺病毒FAdV-4的体系,其特征在于,所述基于CRISPR-Cas12a检测禽腺病毒FAdV-4的体系包括有第一RPA引物对、第二RPA引物对、Cas12a蛋白、crRNA-Fiber2、crRNA-Hexon、ssDNA-reporter、DNA质粒;所述第一RPA引物对包括上游引物RPA-FI-F及下游引物RPA-FI-R,且第一RPA引物对是针对禽腺病毒FAdV-4的Fiber2基因设计得到;所述第二RPA引物对包括上游引物RPA-HE-F及下游引物RPA-HE-R,且第二RPA引物对是针对禽腺病毒FAdV-4的Hexon基因设计得到;所述crRNA-Fiber2是针对禽腺病毒FAdV-4的Fiber2基因设计得到;所述crRNA-Hexon是针对禽腺病毒FAdV-4的Hexon基因设计得到;在基于CRISPR-Cas12a检测禽腺病毒FAdV-4的体系的工作过程中,crRNA-Fiber2或crRNA-Hexon与DNA质粒、Cas12a蛋白形成三元复合体时,引导Cas12a蛋白对第一RPA引物对、第二RPA引物对的扩增产物进行正向剪切,同时Cas12a蛋白自发的反向切割ssDNA-reporter并释放荧光基团。

全文数据:

权利要求:

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