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申请/专利权人：广东优尼德生物科技有限公司
摘要：本发明属于体外诊断技术领域，公开了一种谷氨酸脱羧酶抗体测定试剂盒及其制备方法。所述试剂盒包括谷氨酸脱羧酶抗原包被的磁微粒溶液、羊抗人IgG抗体荧光标记物溶液、样本稀释液、校准品溶液和化学发光底物液。所述谷氨酸脱羧酶抗原包被的磁微粒溶液通过如下方法制备得到：首先以PVA为致孔剂制备多孔壳聚糖微球，然后通过共沉淀原位负载磁性Fe3O4纳米颗粒得到壳聚糖磁性微球，再与谷氨酸脱羧酶抗原混合孵育后用含有BSA的Tris缓冲液重悬得到。本发明所得负载型壳聚糖磁性微球无需进行表面修饰即可与谷氨酸脱羧酶抗原具有良好的亲和力，并具有更好的分散稳定性。所得试剂盒具有检测准确度高、灵敏度高和储存稳定性好的优势。
主权项：1.一种谷氨酸脱羧酶抗体测定试剂盒，其特征在于，包括谷氨酸脱羧酶抗原包被的磁微粒溶液、羊抗人IgG抗体荧光标记物溶液、样本稀释液、校准品溶液和化学发光底物液；所述谷氨酸脱羧酶抗原包被的磁微粒溶液通过如下方法制备得到：（1）多孔壳聚糖微球的制备：将壳聚糖和PVA溶解于醋酸溶液中得到混合溶液，喷雾干燥，得到壳聚糖微球；将所得壳聚糖微球加入到碱性溶液中进行碱溶处理去除PVA成分，过滤洗涤后在密闭的干燥箱中用戊二醛蒸汽交联，得到多孔壳聚糖微球；（2）壳聚糖原位负载磁性微球的制备：将步骤（1）所得多孔壳聚糖微球加入到含有Fe3+和Fe2+的水溶液中搅拌吸附处理，过滤洗涤后加入到热氨水中浸渍反应，反应完成后过滤取沉淀洗涤，干燥，得到壳聚糖磁性微球；（3）谷氨酸脱羧酶抗原包被的磁微粒溶液的制备：将步骤（2）所得壳聚糖磁性微球加入到含有谷氨酸脱羧酶抗原的缓冲液中混合孵育，磁分离后用含有BSA的Tris缓冲液重悬，得到谷氨酸脱羧酶抗原包被的磁微粒溶液；步骤（1）中所述PVA的加入量为壳聚糖质量的2%~25%。
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